[发明专利]粗糠柴苦素在制备抗真菌药物增敏剂中的用途

说明书

本发明涉及医学生物检测技术领域，提供了粗糠柴苦素在制备抗真菌药物增敏剂中的用途、以粗糠柴苦素为活性成分的抗真菌药物增敏剂以及抗真菌组合制剂。本发明通过实验测定，当氟康唑与粗糠柴苦素联合作用时，所有实验菌株的FICI≤0.50，显示出了较强的协同作用，同时使得氟康唑的MIC值降低了2‑16倍，提高了氟康唑对隐球菌的敏感性，既有利于降低临床用药量，也有利于减缓隐球菌耐药率高的现象，为临床抗真菌感染进行了有益探索。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，涉及粗糠柴苦素的新用途，特别是在制备抗真菌药物增敏剂中的用途。

背景技术

受HIV感染、恶性肿瘤、放疗化疗、器官或干细胞移植以及自身免疫性疾病在内的免疫功能低下人群的数量不断增加，以及广谱抗生素的滥用，免疫抑制剂的长期应用，导管介入等新型治疗操作技术的不断拓展等因素的影响，侵袭性真菌感染(隐球菌病)的发病率以及病死率迅速上升。而随着抗真菌药物的不断使用，近10年以来真菌耐药现象越来越普遍，耐药程度也越来越高，与之相对的却是近20年以来并没有抗真菌病新药发明投入到临床使用。

根据美国2018年感染性疾病学会指南介绍，两性霉素B与氟胞嘧啶依旧为隐球菌感染的首选治疗药物，但近些年，隐球菌感染率逐年增加，即使应用指南推荐药物方案治疗，死亡率仍然保持在20％左右，且病死率居高不下。此外，两性霉素以及氟康唑作为基础疗法，存在多种剂量相关和输液相关的不良反应，如肾毒性，溶血性贫血，发热，寒战和呕吐等，限制了其临床应用，特别是虚弱与老年患者。

另外，耐氟康唑(FLZ)的隐球菌分离株逐渐增加，给临床治疗带来新的挑战，加之临床上不正规治疗以及可用抗真菌剂的数量有限等因素，使得隐球菌的耐药率问题越来越困扰着疾病治疗与预后。

粗糠柴苦素(Rattlerin)又称咖马林(Kamalin)，是纯天然中草药粗糠柴树果实中提取的一种多酚类化合物，具有很强的抗氧化、抗炎等生物学和药理学特性，使其成为一种重要的药物分子。在一系列的基础研究中证实粗糠柴苦素可以诱导肿瘤细胞死亡，并可以干扰其传播和生长，目前粗糠柴苦素已在肿瘤生物分子学等领域得到广泛研究，但其和抗真菌药物之间的关系尚未见相关研究报道。

发明内容

本发明是为解决上述问题而进行的，目的在于提供粗糠柴苦素作为抗真菌药物增敏剂中的新用途，同时本发明的目的也在于提供一种以粗糠柴苦素作为活性成分的抗真菌药物增敏剂以及包括该增敏剂的抗真菌组合制剂，提高临床抗真菌药物的抗菌活性。

本发明的第一方面，提供了粗糠柴苦素的新用途，即在制备抗真菌药物增敏剂中的用途。本发明所述的抗真菌药物具体是指抗隐球菌属药物或抗念珠菌属药物，更具体是指目前临床常用的两性霉素B、氟胞嘧啶或氟康唑。

发明人以氟康唑为例，选用13株念珠菌和37株隐球菌作为实验菌株，探索粗糠柴苦素的增敏作用。根据美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory StandardsInstitute,CLSI)提出的标准M27-A3以及补充方案M27-S4肉汤稀释法指南，在30℃下培养上述50株菌48h后，使用96孔板进行体外药敏试验，后读取抗真菌活性(MIC值)。体外药敏试验包括体外单药药敏实验，以及应用棋盘式微量稀释法方案进行体外联合药敏实验，以分数抑菌浓度指数(Fractional Inhibitory Concentration Index,FICI)为判定标准，分析药物相互作用。

单药药敏试验中，氟康唑以及粗糠柴苦素MIC值读取方法与标准：在放大镜观测仪进行视觉读取，与阳性对照孔相比较，酵母类真菌生长≤50％的最低药物浓度；联合药敏试验中，MIC值读取方法与标准：在放大镜观测仪进行视觉读取，与阳性对照孔相比，酵母类真菌生长≤50％的最低药物浓度。通过测定，氟康唑与粗糠柴苦素药物浓度范围分别为64～0.55μg/mL，256～0.25μg/mL。