[发明专利]一种利用分子标记快速培育黑色丝羽乌鸡的育种方法

权利要求书

1.一种利用分子标记快速培育黑色丝羽乌鸡的育种方法，其特征在于：该育种方法是基于PDSS2基因分子标记和MC1R基因分子标记开发的，先使用PDSS2基因分子标记筛选出丝羽纯合子基因型的乌鸡个体进行纯繁，再使用MC1R基因分子标记筛选出黑羽纯合子基因型的乌鸡个体，即完成所述的快速培育黑色丝羽乌鸡的育种。

2.按照权利要求1所述的育种方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将公乌鸡和母乌鸡以混精的方式进行杂交、收集种蛋、孵化，获得F1代幼雏；

(2)于F1代3-4周龄，采集血液并提取基因组DNA，利用丝羽性状的分子标记PDSS2对F1后代进行基因分型，保留片羽杂合子和丝羽纯合子基因型的个体；

(3)当F1代在10周龄时，第一次淘汰羽毛色泽不好、毛色不均匀、倒冠、不起冠的个体；当F1代在18周龄时，第二次淘汰羽毛色泽不好、毛色不均匀、倒冠、不起冠的个体；

(4)将片羽杂合子个体横交，丝羽纯合子基因型个体进行纯繁，继续利用分子标记PDSS2对后代进行基因分型，保留丝羽纯合子基因型的个体；

(5)将步骤(4)筛选得到的个体纯繁扩群，获得F1代幼雏，于F1代3-4周龄，采集个体的血液并提取基因组DNA，利用分子标记MC1R对群体进行基因分型，保留黑羽纯合子个体；

(6)步骤(5)的F1代在10周龄时，第一次淘汰羽毛色泽不好、毛色不均匀、倒冠、不起冠的个体，当F1代在18周龄时，第二次淘汰羽毛色泽不好、毛色不均匀、倒冠、不起冠的个体，即得到纯系黑色丝羽乌鸡。

3.按照权利要求2所述的方法，其特征在于，分子标记PDSS2的检测引物为：

上游5’-GCGCTCTGCGACTCTCAACG-3’，

下游5’-GGGCAGCCATCTTGCGCGTC-3’；

使用分子标记PDSS2的检测引物，以提取到的鸡基因组DNA为模板，进行PCR扩增，对扩增产物进行测序，判读测序结果，在PDSS2基因+103位，基因型为CC的是片羽纯合子个体，基因型为CG的是片羽杂合子个体，基因型为GG的是丝羽纯合子个体，在步骤(2)进行分子标记选种的时候，保留基因型为CG和GG的个体。

4.按照权利要求2所述的方法，其特征在于，分子标记MC1R的检测引物为：

上游5’-ATGTCGATGCTGGCCCCCCT-3’，

下游5’-CTACCAGGAGCACAGCACCAC-3’；

使用上述分子标记引物，以提取到的鸡基因组DNA为模板，进行PCR扩增，对扩增产物进行测序，判读测序结果，在MC1R基因+69位，+212位和+274位，基因型为TT、CC和AA的是黑羽纯合子个体；基因型为CC、TT和GG的是黄羽纯合子个体；基因型为TC、CT和AG的是麻羽个体，在步骤(5)进行分子标记选种的时候，只保留+69位，+212位和+274的基因型分别为TT、CC和AA的个体。

5.按照权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述的乌鸡为东兰三乌鸡。

6.按照权利要求2所述的方法，其特征在于：在步骤(1)中先提取乌鸡个体的基因组DNA，使用分子标记MC1R对群体进行基因分型，选用麻羽个体和黑羽纯合子个体进行混精杂交。

7.按照权利要求2所述的方法，其特征在于：在步骤(1)中先提取乌鸡个体的基因组DNA，使用分子标记MC1R对群体进行基因分型，选用黑羽纯合子公鸡与麻羽母鸡、黑羽纯合子母鸡混精杂交。

8.按照权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤(2)和步骤(4)对幼雏进行分子标记鉴定基因分型的时间为4周龄。

9.权利要求1或2所述的育种方法的应用，其特征在于将它用于鸡的育种。