[发明专利]一种检测抗OX40抗体的方法及其应用

权利要求书

1.一种测定抗OX40抗体生物活性的细胞株的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

a.将连接有OX40的载体转染到细胞中，加压筛选出高表达OX40的细胞株；

b.以含荧光素酶报告基因的质粒为载体，连接NF-κB的反应元件，构建含NF-κB基因的重组质粒；

c.将b中的重组质粒转染到a中筛选出的高表达OX40的细胞株中，加压筛选出高表达荧光素酶的细胞株。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述细胞株包括Jurkat细胞、HUVEC细胞、293细胞、COS7细胞、L929细胞、HepG2细胞、CHO细胞、3T3细胞；优选的，所述细胞为Jurkat细胞。

3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，a中所述的载体为pLVX-OX40。

4.一种单克隆细胞株，其特征在于，所述细胞株由权利要求1-3任一项所述的方法构建而成。

5.一种检测抗OX40抗体的生物活性的产品，其特征在于，所述产品包括权利要求4所述的细胞株。

6.如下任一项所述的应用：

a.权利要求1-3任一项所述的构建方法在制备检测抗OX40抗体的细胞株中的应用；

b.权利要求4所述的细胞株在制备检测抗OX40抗体的生物活性的产品中的应用；

c.权利要求4所述的细胞株在筛选治疗与OX40相关的疾病的候选药物中的应用；

d.权利要求5所述的产品在检测抗OX40抗体的生物活性中的应用。

7.一种检测抗OX40抗体的生物活性的方法，其特征在于，包括以下步骤：

a.将Raji细胞种到96孔板中；

b.将权利要求4所述的单克隆细胞株加到培养了Raji细胞的96孔板中；

c.加入经过系列稀释的抗OX-40抗体；

d.将96孔板放到37℃、5％CO₂的培养箱中进行培养；

e.向各孔中加入荧光素酶检测试剂，进行酶标检测。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述Raji细胞的数目为1×10⁴～5×10⁴个/孔，优选的为5×10⁴个/孔。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，Jurkat细胞株的数目为1×10⁴～5×10⁴个/孔，优选的为1×10⁴个/孔。

10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，培养时间为6-20h，优选的，培养时间为16h。