[发明专利]一种类器官球体的高通量培养方法有效

专利信息
申请号: 201910324990.7 申请日: 2019-04-22
公开(公告)号: CN110042077B 公开(公告)日: 2021-10-19
发明(设计)人: 马少华;蒋盛威 申请(专利权)人: 清华-伯克利深圳学院筹备办公室
主分类号: C12N5/00 分类号: C12N5/00
代理公司: 北京品源专利代理有限公司 11332 代理人: 巩克栋
地址: 518055 广东省深*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 种类 器官 球体 通量 培养 方法
【权利要求书】:

1.一种类器官球体的高通量培养方法,其特征在于,所述高通量培养方法包括以下步骤:

(1)将含细胞的基质胶和氟油分别通入到三通装置中得到类器官球体;

(2)将步骤(1)中得到的类器官球体加热后与3D打印平台联动并将类器官球体进行分配,而后进行培养类器官球体;

所述细胞的个数为1.0×106~5.0×106个;

步骤(1)所述含细胞的基质胶由细胞与基质胶混合后制备得到;

步骤(1)所述通入的方法为注射;

所述注射的方法为:将含细胞的基质胶和氟油分别置于两个注射装置中,然后分别通过管道注射进三通装置中;

所述细胞为原代细胞;

所述基质胶的体积为80~200μL;

所述混合的温度为2~8℃;

所述含细胞的基质胶的流速为10~40μL/min;

所述氟油的流速为40~55μL/min;

所述注射装置的温度为2~8℃;

所述管道的直径为400~900μm;

步骤(2)中所述加热的温度为35~40℃;

步骤(2)中所述3D打印平台的打印速度为0.5~0.9s/孔;

步骤(2)中所述培养的培养基为改良的DMEM/F12培养基;

所述改良的DMEM/F12培养基含有生长因子。

2.根据权利要求1所述的高通量培养方法,其特征在于,所述细胞的个数为2.0×106个。

3.根据权利要求1所述的高通量培养方法,其特征在于,所述基质胶的体积为100μL。

4.根据权利要求1所述的高通量培养方法,其特征在于,所述混合的温度为4℃。

5.根据权利要求1所述的高通量培养方法,其特征在于,所述含细胞的基质胶的流速为20μL/min。

6.根据权利要求1所述的高通量培养方法,其特征在于,所述氟油的流速为50μL/min。

7.根据权利要求1所述的高通量培养方法,其特征在于,所述注射装置的温度为4℃。

8.根据权利要求1所述的高通量培养方法,其特征在于,所述管道的直径为800μm。

9.根据权利要求1所述的高通量培养方法,其特征在于,步骤(2)中所述加热的温度为37℃。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的高通量培养方法,其特征在于,步骤(2)中所述分配为:将类器官球体分配至高通量培养载体中。

11.根据权利要求10所述的高通量培养方法,其特征在于,所述高通量培养载体包括96孔板或384孔板。

12.根据权利要求11所述的高通量培养方法,其特征在于,步骤(2)中所述3D打印平台的打印速度为0.7s/孔。

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