[发明专利]一种类器官球体的高通量培养方法有效
申请号: | 201910324990.7 | 申请日: | 2019-04-22 |
公开(公告)号: | CN110042077B | 公开(公告)日: | 2021-10-19 |
发明(设计)人: | 马少华;蒋盛威 | 申请(专利权)人: | 清华-伯克利深圳学院筹备办公室 |
主分类号: | C12N5/00 | 分类号: | C12N5/00 |
代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 巩克栋 |
地址: | 518055 广东省深*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种类 器官 球体 通量 培养 方法 | ||
1.一种类器官球体的高通量培养方法,其特征在于,所述高通量培养方法包括以下步骤:
(1)将含细胞的基质胶和氟油分别通入到三通装置中得到类器官球体;
(2)将步骤(1)中得到的类器官球体加热后与3D打印平台联动并将类器官球体进行分配,而后进行培养类器官球体;
所述细胞的个数为1.0×106~5.0×106个;
步骤(1)所述含细胞的基质胶由细胞与基质胶混合后制备得到;
步骤(1)所述通入的方法为注射;
所述注射的方法为:将含细胞的基质胶和氟油分别置于两个注射装置中,然后分别通过管道注射进三通装置中;
所述细胞为原代细胞;
所述基质胶的体积为80~200μL;
所述混合的温度为2~8℃;
所述含细胞的基质胶的流速为10~40μL/min;
所述氟油的流速为40~55μL/min;
所述注射装置的温度为2~8℃;
所述管道的直径为400~900μm;
步骤(2)中所述加热的温度为35~40℃;
步骤(2)中所述3D打印平台的打印速度为0.5~0.9s/孔;
步骤(2)中所述培养的培养基为改良的DMEM/F12培养基;
所述改良的DMEM/F12培养基含有生长因子。
2.根据权利要求1所述的高通量培养方法,其特征在于,所述细胞的个数为2.0×106个。
3.根据权利要求1所述的高通量培养方法,其特征在于,所述基质胶的体积为100μL。
4.根据权利要求1所述的高通量培养方法,其特征在于,所述混合的温度为4℃。
5.根据权利要求1所述的高通量培养方法,其特征在于,所述含细胞的基质胶的流速为20μL/min。
6.根据权利要求1所述的高通量培养方法,其特征在于,所述氟油的流速为50μL/min。
7.根据权利要求1所述的高通量培养方法,其特征在于,所述注射装置的温度为4℃。
8.根据权利要求1所述的高通量培养方法,其特征在于,所述管道的直径为800μm。
9.根据权利要求1所述的高通量培养方法,其特征在于,步骤(2)中所述加热的温度为37℃。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的高通量培养方法,其特征在于,步骤(2)中所述分配为:将类器官球体分配至高通量培养载体中。
11.根据权利要求10所述的高通量培养方法,其特征在于,所述高通量培养载体包括96孔板或384孔板。
12.根据权利要求11所述的高通量培养方法,其特征在于,步骤(2)中所述3D打印平台的打印速度为0.7s/孔。
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