[发明专利]岩藻聚糖作为PCSK9抑制剂的应用及其制备方法

权利要求书

1.岩藻聚糖作为PCSK9抑制剂的应用。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述岩藻聚糖分离于藻类或棘皮动物中。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于：所述岩藻聚糖分离于藻类时的的提取方法包含有如下步骤：

(1）制备岩藻聚糖粗品：

藻类清洗，浸泡除盐，粉碎机粉碎，60℃烘干，再次粉碎，过100目筛，将粉碎干燥的藻类，加入石油醚或乙酸乙酯；90℃冷凝回流除去大部分色素、脂质；滤渣干燥，研磨，采用水提法提取，90℃水浴加热3h，离心得上清液和滤渣，滤渣重复水提3次，收集上清液然后浓缩至原体积的三分之一，并根据浓缩液的体积计算需要加入氯化钙的量，使其终浓度达2%，边加边搅拌，这时会看到白色絮状沉淀出现即为褐藻胶，经离心除去沉淀并收集上清，加入95%乙醇至乙醇的终浓度达60%，过夜使岩藻多糖充分沉淀，次日倾倒出上层乙醇溶液，沉淀部分经无水乙醇洗涤除去水分，然后减压干燥得岩藻多糖粗品；

（2）岩藻聚糖的纯化：岩藻聚糖先经Q-Sepharose F.F阴离子交换柱，采用ÄKTApure150进行分离纯化，0-2mol/L的氯化钠线性洗脱，收集峰对应组分，经浓缩、透析、冷冻干燥得泡叶藻岩藻聚糖半成品；上述岩藻聚糖半成品再经Sephacryl SH-200柱层析，即可分离得到岩藻聚糖成品，经NMR、液相色谱和IR分析，确定其为岩藻聚糖。

4.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述岩藻聚糖分离于棘皮动物时的提取方法包含有如下步骤：所述棘皮动物为海参，

（1）制备海参岩藻聚糖粗品：海参清洗，浸泡除盐，粉碎机粉碎，60℃烘干，再次粉碎，过100目筛；将粉碎干燥的海参100g，加入2L浓度为0.1M，pH=6的醋酸盐缓冲溶液中，溶液中含有10g木瓜蛋白酶，溶液中EDTA的浓度为5mM，半胱氨酸的浓度为5mM,于60摄氏度降解24 h,所得混合液在2000×g，4摄氏度离心10 min,获得上清溶液；上清液浓缩至1L，加入2倍体积的浓度为95%的乙醇，过夜使岩藻多糖充分沉淀，次日倾倒出上层乙醇溶液，沉淀部分经无水乙醇洗涤除去水分，然后减压干燥得岩藻多糖粗品；

（2）海参岩藻聚糖的纯化海参岩藻聚糖先经Q-Sepharose F.F阴离子交换柱，采用ÄKTApure 150进行分离纯化，0-2mol/L的氯化钠线性洗脱，收集第2个峰对应组分，经浓缩、透析、冷冻干燥得海参岩藻聚糖半成品；上述海参岩藻聚糖半成品再经Sephacryl S-200丙烯葡聚糖凝胶柱层析，即可分离得到海参岩藻聚糖成品LFUC-H，经液相色谱和IR分析，确定其为岩藻聚糖。