[发明专利]一种用于荧光成像介导的光热肿瘤治疗的光热试剂的制备方法及其应用

说明书

本发明涉及一种用于荧光成像介导的光热肿瘤治疗的光热试剂的制备方法及其应用，该方法包括：将二棕榈酰基卵磷脂、氢化大豆磷脂、高纯胆固醇、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺‑聚乙二醇2000、吲哚菁绿置于氯仿和甲醇混合溶液中溶解，制备得到薄脂质膜；将薄脂质膜在含有碳点的硫酸铵溶液中水化、超声、挤出、除去游离的吲哚菁绿和碳点，并在含有碳点的硫酸铵溶液中水化、超声、挤出、透析，制得热敏性脂质体‑吲哚菁绿‑碳点复合纳米颗粒。本发明所述的复合纳米颗粒在可见光到近红外区均有明显的吸收，其在激光照射下具有明显的细胞毒性，其能有效靶向并长时间停留在肿瘤处，从而有效治疗肿瘤，且对各主要器官均无明显的病理性损失，更具安全性和高效性。

技术领域

本发明属于光热试剂制备技术领域，尤其涉及一种用于荧光成像介导的光热肿瘤治疗的光热试剂的制备方法及其应用。

背景技术

近红外光热治疗剂是指利用在近红外光区具有较高光热转换效率的试剂，将其通过血管注射入生物内部，利用靶向性识别技术聚集在肿瘤组织附近，并在近红外光的照射下将光能转化为热能来杀死癌细胞的一种治疗试剂。常见的光热治疗试剂有贵金属纳米颗粒、碳类材料、金属与非金属化合物和有机染料物质。但是目前的光热治疗剂的靶向性差、近红外区吸收能力差等特点，限制了光热治疗剂在临床中的应用。

目前临床上对肿瘤的主要诊断方式主要有核磁共振、计算机断层扫描等，这些检测手段不仅在特异性和灵敏度方面有很大的不足，而且具有难以避免的放射性风险。光学分子影像学是一种发展迅速的生物医学影像技术，具有无辐射、无创伤、成本低、检测方便和实时监控等优点。然而，目前绝大部分与光学分子影像学相关的研究工作使用的造影剂都未获得美国食品药品监督管理局的批准，容易引起难以预知的生物安全性问题。吲哚菁绿(ICG)是唯一被美国食品药品监督管理局(FDA)批准，可用于临床使用的近红外荧光造影剂。在临床上，ICG被广泛应用于对肝功能、心输出量、视网膜的脉管系统的辅助诊断。它还能作为荧光探针发射波长为820nm的近红外荧光，同时能作为感光剂，吸收光能并将其转化成热能或产生单线态氧，进而杀伤肿瘤细胞。然而，ICG在水溶液中很不稳定、在血液循环中容易被快速清除，分子间容易形成二聚体导致荧光淬灭。这些不足严重限制了ICG在肿瘤诊断及治疗方面的应用。研究人员近年来尝试利用各类纳米载体搭载ICG，以期提高其稳定性、延长其血液循环时间并赋予其肿瘤靶向性。

脂质体作为药物载体，具有可生物降解、无免疫原性、无毒性和特异性肿瘤靶向等优点，利用脂质体搭载药物可提高药物的治疗指数、降低药物剂量并降低毒副作用。近年来脂质体作为药物载体的研究已取得长足的进步，已有研究发现将HSA包覆于脂质体表面可降低微粒对巨噬细胞的亲和力，从而延长循环时间提高靶向性。

碳点的特点为易溶于水、毒性低、绿色环保、研制成本低、可生物相容等优点，是一种新型碳基零维材料，也是一种制备新型光热治疗剂的理想材料，但由于碳点尺寸小，不能通过静脉注射有效的进入到肿瘤部位。

但目前并未涉及将碳点和荧光染料(ICG)双重靶向近红外光热治疗剂的报道。

发明内容

为了克服现有技术中存在的缺陷，本发明提供一种用于荧光成像介导的光热肿瘤治疗的光热试剂的制备方法，其将碳点和荧光染料(ICG)包封于热敏性脂质体中，借助脂质体的较大尺寸被动靶向到肿瘤部位，随后通过近红外激光辐照产生光热转换，达到杀死肿瘤的作用，实现双重靶向近红外光热治疗剂的制备；具体为用于荧光成像介导的光热肿瘤治疗的热敏性脂质体-吲哚菁绿-碳点复合纳米颗粒的制备，并对其荧光成像和光热治疗性能进行相应的研究。

为了实现上述目的，本发明采取的技术方案包括：

本发明的第一个目的是提供一种用于荧光成像介导的光热肿瘤治疗的光热试剂的制备方法，其特征在于，所述光热试剂为热敏性脂质体-吲哚菁绿-碳点复合纳米颗粒，所述制备方法包括：