[发明专利]一种基于PtCu RNDFs的电化学传感器的制备方法及应用

说明书

本发明属于免疫分析和生物传感技术领域，提供了一种基于PtCu RNDFs的电化学传感器的制备方法及应用。本发明使用N‑MoS₂QDs@MWCNTs作为基底材料，其优良的导电性、大的比表面积和高催化活性可以有效减小背景信号；同时利用PtCuRNDFs与检测抗体孵化作为信号标记以进一步增强电化学传感器的催化性能、放大信号，实现了对黄曲霉毒素的定量检测，具有检测限低，灵敏度高，重复性、选择性和稳定性好等优势，对黄曲霉毒素的检测具有重要的科学意义和应用价值。

技术领域

本发明属于免疫分析、纳米材料和生物传感技术领域，提出了一种基于PtCuRNDFs的电化学传感器的制备方法及应用。

背景技术

近年来，食品污染日趋严重和频繁，在造成巨额经济损失的同时也严重威胁到了人类的健康。黄曲霉毒素存在于土壤、动植物、各种坚果中，特别容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麦等粮油产品，是霉菌毒素中毒性最大、对人类健康危害极为突出的一类霉菌毒素。由于分布广泛，很容易通过污染的谷物或饲料等进入食物链，进而污染奶、蛋、肉等动物源食品，间接的进入人体内，最终造成肝肾损伤、繁殖障碍、免疫抑制、致癌致畸等严重后果。

目前黄曲霉毒素的检测方法有薄层分析法、液相色谱法、荧光光度法、酶联免疫法、毛细管电泳法、电化学免疫分析法等。其中薄层分析法操作繁琐、费时，萃取和净化效果不理想，灵敏度差；液相色谱法仪器设备价格昂贵，前处理方法相对繁琐；荧光光度法检测费用较高，需要配置专用设备，且不能对单一的毒素进行检测；酶联免疫分析法重复性差、试剂寿命短、需低温保存、假阳性概率较高；毛细管电泳法成本较高，操作复杂，不适宜在试样检测中广泛应用；而电化学免疫分析法具有选择性高、响应快、操作简单、携带方便和适合于现场检测等优点，因此科研工作者正积极探索研制新型电化学传感器用于检测黄曲霉毒素。

本发明专利成功构建了一种基于PtCuRNDFs的电化学传感器，该传感器基底材料为N-MoS₂QDs@MWCNTs，其中N-MoS₂QDs不仅具有良好的电催化活性，而且具有强导电性；而多壁碳纳米管具有大的比表面积，同时导电性强，羧基化后可以负载大量N-MoS₂QDs和捕获抗体Ab₁。PtCu RNDFs作为检测抗体标记物，可以增加免疫传感器的灵敏度并进一步提高催化活性，实现检测信号的进一步放大，同时PtCu合金十二面体纳米框架的结构具有大的比表面积，可以负载大量检测抗体Ab₂。本发明采用N-MoS₂QDs@MWCNTs作为基底材料，PtCu RNDFs作为检测抗体标记物构建的电化学传感器，实现了对黄曲霉毒素的检测，具有低检测限，高灵敏度，可接受的重复性，选择性和稳定性，对黄曲霉毒素的检测具有重要的科学意义和应用价值。

发明内容

本发明提供了一种基于PtCu RNDFs的电化学传感器的制备方法及应用，实现了对黄曲霉毒素的灵敏检测。

本发明的目的之一是提供一种基于PtCu RNDFs的电化学传感器的制备方法。

本发明的目的之二是将所制备的一种基于PtCu RNDFs的电化学传感器应用于黄曲霉毒素的高灵敏、特异性检测。

本发明的技术方案，包括以下步骤。

1. 一种基于PtCu RNDFs的电化学传感器的制备方法，步骤如下：

（1）将直径为4 mm的玻碳电极用Al₂O₃抛光粉打磨成镜面，超纯水清洗干净；

（2）将6 µL、1.0 ~ 3.0 mg/mL的N-MoS₂QDs@MWCNTs溶液滴涂于上述电极表面，室温下晾干，超纯水冲洗电极表面，晾干；

（3）继续将6 µL、8 ~ 12 µg/mL的黄曲霉毒素捕获抗体Ab₁滴加到电极表面，超纯水冲洗，4 °C冰箱中干燥；