[发明专利]一种厌氧氨氧化菌种的保藏及恢复方法有效
申请号: | 201910329646.7 | 申请日: | 2019-04-23 |
公开(公告)号: | CN110129203B | 公开(公告)日: | 2021-05-11 |
发明(设计)人: | 范念斯;白昱慧;张权;吴静;倪绍凯;金仁村 | 申请(专利权)人: | 杭州师范大学 |
主分类号: | C12N1/04 | 分类号: | C12N1/04;C12N1/20;C02F3/28;C02F3/34;C02F101/16;C12R1/01 |
代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人: | 胡红娟 |
地址: | 311121 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 厌氧氨 氧化 菌种 保藏 恢复 方法 | ||
1.一种厌氧氨氧化菌种的保藏方法,包括:
(1)将含有厌氧氨氧化菌种的污泥用无机盐溶液冲洗后保存在保藏容器中;
(2)向保藏容器中加入保护剂混合均匀,去除混合液中的溶解氧后置于4~25℃下保藏;所述保护剂为水和厌氧氨氧化菌的胞外聚合物的混合物,所述厌氧氨氧化菌的胞外聚合物通过蒸汽法提取;
所述蒸汽法的步骤包括:
(I)将厌氧氨氧化污泥清洗后加入水中,离心得到污泥沉淀物;
(II)将污泥沉淀物加入0.9%生理盐水中,在0.6~1.0MPa、100~110℃下高压蒸汽灭菌0.5~1.5h后,离心得到的上清液即为厌氧氨氧化菌的胞外聚合物。
2.根据权利要求1所述的厌氧氨氧化菌种的保藏方法,其特征在于,所述无机盐溶液的组成包括:KH2PO4、CaCl2·2H2O、MgSO4·2H2O和KHCO3。
3.根据权利要求1所述的厌氧氨氧化菌种的保藏方法,其特征在于,所述污泥的体积与保藏容器的容积之比为1:1.5~3。
4.根据权利要求1所述的厌氧氨氧化菌种的保藏方法,其特征在于,所述污泥的体积与保护剂的体积之比为1:0.5~2。
5.根据权利要求1所述的厌氧氨氧化菌种的保藏方法,其特征在于,所述厌氧氨氧化菌的胞外聚合物与保护剂的体积比为1:5~10。
6.根据权利要求1所述的厌氧氨氧化菌种的保藏方法,其特征在于,所述去除混合液中的溶解氧的具体方法为向混合液中通入稀有气体或氮气,曝气15~30min。
7.一种厌氧氨氧化菌种的恢复方法,包括:
(a)从权利要求1~6任一权利要求所述的保藏有厌氧氨氧化菌种的保藏容器中取出污泥,用水和所述的无机盐溶液分别冲洗后置于反应器内,反应器运行条件如下:避光且温度为30~36℃、水力停留时间为1.5~2h,进水中氨氮和亚硝氮的浓度相同且不大于70mg L-1;
(b)分阶段提升进水中氨氮和亚硝氮的浓度,且每一阶段的进水中氨氮和亚硝氮的浓度相同,直至进水中氨氮与亚硝氮的浓度均不小于280mg L-1,且反应器的总氮去除效率不低于88%,完成厌氧氨氧化菌种的恢复。
8.根据权利要求7所述的厌氧氨氧化菌种的恢复方法,其特征在于,所述进水中还含有KH2PO4、CaCl2·2H2O、MgSO4·2H2O、KHCO3、微量元素浓缩液I和微量元素浓缩液II;
所述微量元素浓缩液I的组分包括EDTA和FeSO4·7H2O;
所述微量元素浓缩液II的组分包括EDTA、H3BO4、MnCl2·4H2O、CuSO4·5H2O、ZnSO4·7H2O、NiCl2·6H2O、NaMoO4·2H2O和CoCl2·6H2O。
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