[发明专利]一种利用改性琼脂制备生物乙醇的方法

权利要求书

1.一种利用改性琼脂制备生物乙醇的方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）原料预处理：称取25g的琼脂粉于1L的烧杯中，配制一定浓度的乙醇溶液加入，加入11mL的H₂O₂，调节pH，加热搅拌反应一段时间后过滤，滤渣加水常温下搅拌30min，然后再过滤，反复洗涤，得到低硫酸根琼脂液体；

（2）改性琼脂的糖化：向琼脂液体中加入HCl调节pH至6-8，加入琼胶酶和纤维二糖酶，酶解；再次加入HCl调节pH至4-6，加入果胶酶酶解得到改性琼脂的糖化液；

（3）将糖化液进行离心后，收集上清液，并进行高温灭菌；

（4）将活化后的酿酒酵母菌株接入步骤（3）中所得到的上清液中，进行厌氧发酵，发酵完的发酵液采用减压蒸馏的方法蒸出乙醇；

步骤（1）加入H₂O₂，调pH为9；加热温度为30摄氏度，加热搅拌时间为2h；所述琼胶酶、纤维二糖酶和果胶酶相对于低硫酸根琼脂液体的加入量：琼胶酶的加入量为1%w/v，纤维二糖酶的加入量为0.1%w/v，果胶酶的加入量为0.1%v/v；步骤（1）的乙醇浓度为45%v/v。

2.根据权利要求1所述的一种利用改性琼脂制备生物乙醇的方法，其特征在于：步骤（2）中加入的琼胶酶的酶活力为100U/g，纤维二糖酶的酶活力为250U/g以上，所述果胶酶的酶活力为4000U/ml。

3.根据权利要求1所述的一种利用改性琼脂制备生物乙醇的方法，其特征在于：琼胶酶和纤维二糖酶的酶解条件为：30-50℃酶解12-15h；果胶酶的酶解条件为：40-60℃酶解50-70h。

4.根据权利要求1所述的一种利用改性琼脂制备生物乙醇的方法，其特征在于：步骤（3）中离心的条件为：4000-6000r/min离心15-20min。

5.根据权利要求1所述的一种利用改性琼脂制备生物乙醇的方法，其特征在于：步骤（4）中所选用的酿酒酵母菌株，在接种发酵前，要进行菌种的活化，活化的条件：将冰箱保存的种子接入马铃薯葡萄糖液体培养基中，在28℃，120r/min的摇床中振荡培养24h。

6.根据权利要求5所述的一种利用改性琼脂制备生物乙醇的方法，其特征在于：马铃薯葡萄糖液体培养基配方为：马铃薯提取物10g，葡萄糖20g，蒸馏水1000ml。

7.根据权利要求1所述的一种利用改性琼脂制备生物乙醇的方法，其特征在于：步骤（4）中将得到的活化酵母按2%-10%的体积比接入步骤中（3）所得到的上清液中，在28-45℃下厌氧发酵2-4天。