[发明专利]干扰素IFNβ在抗犬新孢子虫的医用用途

说明书

本发明公开了干扰素IFNβ在抗犬新孢子虫的医用用途，通过调控宿主免疫水平来清除新孢子虫，显著抑制细胞和宿主中新孢子虫感染量，起到较为有效的治疗效果。本发明为犬新孢子虫的治疗提供了新的候选药物，能够较好的治疗新孢子虫的感染，为公共卫生和养殖业提供了控制新孢子虫病新的途径，为彻底防控新孢子虫病奠定了基础。

技术领域

本发明公开了干扰素IFNβ在抗犬新孢子虫的医用用途，用于新孢子虫病的治疗，属于生物制品技术领域。

背景技术

新孢子虫病（Neosporiasis）是由犬新孢子虫（Neospora caninum）寄生于犬、牛、羊等多种哺乳动物细胞内所引发的一种原虫病。该病对牛的危害最为严重，主要引起孕畜流产或死胎以及新生儿运动神经障碍等，从而降低牛的经济价值，对牛是原发性重要致病原，对畜牧业尤其是养牛业的危害严重。而且近年来，也有报道称在人体血清中检测到了新孢子虫的抗体，虽然目前尚无关于新孢子虫感染人的病例报道，但是新孢子虫对人的潜在威胁也不容忽视，还不能排除新孢子虫病的人畜共患潜在性。鉴于新孢子虫病在公共卫生的潜在危险和畜牧、养殖业的重要意义，该病逐渐成为近年来兽医学界研究的重要课题。

然而，目前尚无针对新孢子虫的有效疫苗和特效药物，已发现的药物中，有研究报道使用磺胺类药物、大环内酯类药物、克林霉素等药物治疗新孢子虫病，但疗效不甚明显。

目前市场上有商品化的新孢子虫灭活疫苗，灭活疫苗对新孢子虫病仅可起到一定的预防效果。另外一种常见的疫苗是新孢子虫活疫苗，此种疫苗在短期内可做到有效地防控新孢子虫病，但其安全性问题和回归致病性风险是其主要缺点，故活疫苗的广泛使用受到极大的限制。

综上所述，目前仍没有有效治疗和防治新孢子虫的药物及疫苗，这给新孢子虫病的防控造成了巨大的困难，因此迫切需要寻找新的治疗新孢子虫病的有效药物。

发明内容

本发明目的是提供一种干扰素IFNβ在抗犬新孢子虫的医用用途，对于犬新孢子虫病有明显治疗作用；本发明还提供了该蛋白的作用途径和使用浓度。

本发明所述的干扰素IFNβ是一种天然糖蛋白，属于细胞因子超家族，由大多数脊椎动物的免疫细胞在病毒、寄生虫和肿瘤细胞等刺激时产生。干扰素是宿主防御和稳态的细胞外蛋白，IFNβ具有明确的抗病毒、抗增殖和免疫调节特性。重组小鼠IFNB1由166个氨基酸组成，分子质量为20.3kDa，稳定性为：粉末状态于-80℃可保存2年以上，溶液状态（溶于PBS中）于-20℃可保存半年。编码小鼠IFNB1 (NCBI基因号：P01575) (Met 1-Asn 182)的DNA序列与c端5个氨基酸(DDDDK)融合表达并纯化,内毒素< 1.0EU/μg。

本发明在体内和体外分别用重组蛋白IFNβ治疗感染新孢子虫的巨噬细胞和小鼠，观察其对感染新孢子虫的宿主细胞和小鼠体内治疗效果。同时提供该药物的工作浓度以及潜在的作用途径，为抗犬新孢子虫感染提供新的药物，为未来新孢子虫病的治疗提供新的候选药物。

本发明通过荧光定量分析细胞及宿主组织中IFNβmRNA表达水平，确定新孢子虫感染宿主能够诱导机体表达IFNβ。随后利用IFNβ蛋白治疗新孢子虫细胞感染模型和动物感染模型，分析IFNβ对细胞和宿主中新孢子虫的清除效果。统计细胞模型中新孢子虫的增殖抑制情况，同时分析IFNβ治疗后小鼠体重变化，利用绝对定量分析带虫量和利用流式细胞术分析初始感染部位（腹腔灌洗液）免疫细胞数及细胞类型。

本发明积极效果在于：

发现了较为有效的治疗新孢子虫感染的蛋白--IFNβ,提供了干扰素IFNβ在抗犬新孢子虫的医用用途，通过调控宿主免疫水平来清除新孢子虫，显著抑制细胞和宿主中新孢子虫感染量，起到较为有效的治疗效果。本发明为犬新孢子虫的治疗提供了新的候选药物，能够较好的治疗新孢子虫的感染，为公共卫生和养殖业提供了控制新孢子虫病新的途径，为彻底防控新孢子虫病奠定了基础。