[发明专利]一种光合细菌菌液的制备方法

说明书

本发明公开了一种光合细菌菌液的制备方法，属于菌液制备技术领域。针对现有技术中制备光合细菌成本较高且制得的光合细菌活性较低的问题，本发明提供一种光合细菌菌液的制备方法，它包括光合细菌基础培养液的制备；豆粕糊浆的制备以及在制备的基础培养液上接种光合细菌，并添加豆粕糊浆，将基础培养液置于光照条件下进行培养，待光合细菌基础培养液呈深红色后，补加豆粕糊浆，待光合细菌呈稠状时，培养完成。本发明制备光合细菌所需的原料较少，避开了使用酵母膏的高成本及多种化合物制作培养基的繁琐之处；采用豆粕为原料，豆粕含有较高的蛋白质，能够为光合细菌的培养提供营养，且成本较低；所得产品光合细菌菌液中活菌数超高，呈血液般稠状。

技术领域

本发明属于菌液制备技术领域，更具体地说，涉及一种光合细菌菌液的制备方法。

背景技术

红螺菌科(Rhodospirillaceae)假单胞菌属的光合细菌如沼泽红假单胞菌、荚膜红假单胞菌、球形红假单胞菌，为水产、环保和饲料中经常使用的有益微生物，研究表明，光合细菌自身生长代谢会产生丰富的B族维生素，类胡萝卜素，辅酶Q10，叶酸等，因此，作为动物饲料添加剂具有非常高的营养价值。此外，光合细菌能有效去除废水中的有机物、以及氮、磷、硫化物，常被用在水产养殖领域来降低水塘中的氨氮、亚硝酸盐及有机物。其培养基配方也有很多种，但综合概览，商品培养基由于使用较多酵母提取物，成本都比较高，自制培养基菌的生长浓度不足，且最终产出的菌液中很少能够达到标识的菌数，通常标识中光合菌菌数为10～50亿cfu(菌液)100～200亿cfu(菌粉)，但终产品检测中发现很少有能超过20亿cfu的光合菌菌液产品，商品光合菌菌粉中，大部分活菌也已因干燥而丧失活力。

针对上述问题也进行了相应的改进，如中国专利申请号CN201310036820.1，公开日为2013年6月12日，该专利公开了一种制备光合细菌菌液的方法，其步骤是：(1)将装有光合细菌菌种的冻存管进行溶解复苏，溶解后的菌液成为复苏菌液；(2)在超净工作台上，用复苏菌液在平板固体培养基上划线，将划线后的平板固体培养基在30℃恒温培养箱中静置培养24～36小时长出单菌落后，用接种环挑取平板固体培养基上的单菌落在斜面培养基上划线，划线后的斜面培养基在30℃培养箱中静置培养24～36小时菌落长出；(3)菌落长出后，用光合细菌液培养基将斜面培养基上的菌落洗脱下来成为菌落溶液，菌落溶液进行初次培养得到初次培养菌液，初次培养菌液进行转接培养得到转接培养菌液。本发明具有培养基配制及培养过程简单，菌液浓度高，质量好的特点。该专利的不足之处在于：虽然制备的菌液浓度高，但是制备的成本较高，并且在培养基上划线误差较大。

又如中国专利申请号CN201210556654.3，公开日为2014年6月25日，该专利公开了一种光合细菌液固双重发酵高浓度微生态制剂的制备方法，包括平板培养基培养、试管培养，三角瓶培养，二级种子的制备、三级种子的制备，成品的制备等步骤。该专利的不足之处在于：虽然加工成本较低，不易染杂菌，但是制备步骤较多，效率较低。

发明内容

1.要解决的问题

针对现有技术中制备光合细菌成本较高且制得的光合细菌活性较低的问题，本发明提供一种光合细菌菌液的制备方法。本发明制备光合细菌所需的原料较少，避开了使用酵母膏的高成本及多种化合物制作培养基的繁琐之处；采用豆粕为原料，豆粕含有较高的蛋白质，能够为光合细菌的培养提供营养，且成本较低；所得产品光合细菌菌液中活菌数超高，呈血液般稠状。

2.技术方案

为了解决上述问题，本发明所采用的技术方案如下：

一种光合细菌菌液的制备方法，包括以下步骤：

(1)制备光合细菌基础培养液：包括无水乙酸钠2.0～2.5g/L，碳酸氢铵2.0～2.5g/L，七水合硫酸镁0.3～0.5g/L，磷酸二氢钾0.5～1g/L；

(2)制备豆粕糊浆：将豆粕打粉加入水中进行煮沸、冷却；