[发明专利]一种多环芳烃高效降解菌及其富集筛选方法和应用

权利要求书

1.一种多环芳烃高效降解菌，其特征在于：所述多环芳烃高效降解菌为硝基黄杆菌属(Diaphorobacter sp.)YM-6，革兰氏染色为阴性，菌体形态为无芽孢杆菌，菌落呈黄色、圆形、凸起、边缘整齐、光滑湿润。

2.如权利要求1所述的多环芳烃高效降解菌的富集筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将沉积物样品加入无菌水中震荡3h，沉积物：无菌水＝1:9；

(2)制备富集微生物的培养基，其配方如下(g/L)：K₂HPO₄·3H₂O 4.25，NaH₂PO₄·H₂O 1，NH₄CL₂，MgSO₄·7H₂O 0.2，FeSO₄·7H₂O 0.012，MnSO₄·H₂O 0.003，ZnSO₄·7 H₂O 0.003，CoSO₄·7H₂O 0.001，pH为7，加入定量的菲作为唯一碳源，制备出不同浓度梯度的富集筛选培养基；筛选单一菌株的平板培养基：富集培养基加入2％的琼脂制成固体培养基，表面喷涂菲-丙酮溶液，待丙酮挥发后使用；

(3)将步骤(1)中上清液加入到步骤(2)中培养基中，在30℃、150r/min条件下进行避光培养7天，7天后将菲浓度设置为150mg/L，继续转接培养，依次增加菲浓度进行转接培养，当转接次数大于7次时，可获得多环芳烃高效降解菌群；

(4)将步骤(3)中的菌群在平板上进行稀释涂布，挑选单菌落转接至含菲无机盐液体培养基验证降解能力，挑选降解速率大的菌株进行复筛，进行多次平板划线，经多次平板划线后获得多环芳烃高效降解菌株。

3.根据权利要求2所述的多环芳烃高效降解菌的富集筛选方法，其特征在于：所述原始样品为沉积物。

4.如权利要求1所述的多环芳烃高效降解菌的应用，其特征在于：所述多环芳烃高效降解菌应用于降解有机芳香化合物中。

5.根据权利要求4所述的多环芳烃高效降解菌的应用，其特征在于：所述有机芳香化合物为多环芳烃类化合物。