[发明专利]一种海产品中有机锡类环境激素的分散固相萃取气相色谱质谱检测方法

说明书

本发明公开了一种海产品中有机锡类环境激素的分散固相萃取气相色谱质谱检测方法，采用超声波萃取、冷冻脱脂、第一次分散固相萃取净化、衍生和反萃取、第二次分散固相萃取净化、气相色谱质谱法测定海产品中的有机锡，该方法操作简单，能快速完成样品前处理，其中首次采用两次分散固相萃取进行净化，整个分散固相萃取净化加上衍生和反萃取过程只需要20～30min，结果准确，九种有机锡检出限为0.4～1.0μg/kg，回收率为80～117％，相对标准偏差(n＝5)为3.8～7.5％，具有较高的灵敏度和令人满意的回收率及重现性，能用于海产品中有机锡的含量测定。

技术领域

本发明涉及一种海产品污染检测技术领域，尤其是涉及一种海产品中有机锡类环境激素的分散固相萃取气相色谱质谱检测方法。

背景技术

有机锡作为一类重要的环境激素广泛分布在大气、水体、土壤、底泥、生物体等各种介质中，具有雄性激素效应，干扰内分泌系统，导致生殖、发育和行为异常，常被广泛用作聚氯乙烯稳定剂、船体防污材料、木材防腐剂、杀虫剂、杀菌剂，其中三丁基锡、三苯基锡及其降解产物已被世界多个国家列为“优先污染物黑名单”。尽管有机锡污染已引起全球重视，但由于半衰期较长，可持久存在。溶解态的有机锡化合物更易进入海水中迁移或者通过生物富集进入食物链中，尤其是三丁基锡和三苯基锡因脂溶性较高而易在生物体内富集。大量研究表明，有机锡在鱼类，贝类等生物体内，生物浓缩系数最高达8700000，并具有生物放大作用，一旦被人类食用，最终将威胁人类健康和生命。有报告指出世界各地海洋哺乳动物体内存在高浓度的有机锡化合物，它们能使哺乳动物免疫系统防御能力下降，使神经系统中毒，致突变、致癌等。除海洋食物网，在人体肝脏中也发现了三丁基锡，这很可能是由于摄入人体的海鲜受到了有机锡的污染。据报道，仅三丁基锡，在南海贝类中检出浓度为未检出～249.9μg/kg(以Sn计)，均值67.6 μg/kg(以Sn计)；南海鱼类检出浓度为未检出～1377.8μg/kg(以Sn计)，均值 26.3μg/kg(以Sn计)；渤海湾软体动物检出浓度为<2.8～383.9μg/kg(以Sn计)。

我国目前对食品中有机锡的限量还未作规定。欧洲食品安全管理局已经宣布了二丁基锡、三丁基锡、三苯基锡和二辛基锡有免疫毒性，并规定食品中这些有机锡总和的最大限量标准为40μg/kg(以Sn计)，一甲基锡和二甲基锡最大限量标准为180μg/kg(以Sn计)，一辛基锡最大限量标准为1200μg/kg(以Sn计)。然而，其他有机锡化合物的限量标准现也还尚无定论，这与方法检出限和一次性能检出的有机锡化合物种类有着直接关系。现有报道的大多数方法一次大多检测3～6种有机锡化合物。因此，分析海产品中有机锡尤为重要。

目前，国内外主要采用索氏提取、振荡萃取、微波辅助提取、加速溶剂萃取、超声波萃取等萃取技术，结合层析柱净化、固相萃取、凝胶渗透色谱净化的等一种或两种净化方法，再采用气相色谱法、高效液相色谱法、气相色谱-质谱法、气相色谱串联质谱法等技术进行生物体中有机锡检测。

而海产品基质复杂，前处理及净化步骤成为样品中有机锡残留分析的关键。对脂肪、色素含量较多的海产品，通常需要凝胶渗透色谱和硅胶柱或弗罗里硅土柱固相萃取的联合净化，而凝胶渗透色谱法仪器昂贵，需要使用大量的洗脱溶剂，固相萃取法操作复杂，需要进行萃取柱活化、上样、淋洗、洗脱等过程，耗时较长，均不适合批量化样品处理。分散固相萃取具有快速、简单、便宜、有效、可靠和安全的特点，已逐步应用到各种农副产品和环境介质中各种有机污染物检测。因此，开发一种简单的前处理及净化方法，并结合高灵敏的气相色谱质谱检测技术有望解决现有技术瓶颈。

发明内容

本发明的发明目的是为了提供一种海产品中有机锡类环境激素的分散固相萃取气相色谱质谱检测方法，该检测方法操作简单，能快速完成样品前处理，具有较高的灵敏度和令人满意的回收率及重现性，能用于海产品中有机锡的含量测定。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

本发明的一种海产品中有机锡类环境激素的分散固相萃取气相色谱质谱检测方法，包括以下步骤：