[发明专利]一种氧化低密度脂蛋白荧光检测试剂盒及制备方法

说明书

本发明公开了一种氧化低密度脂蛋白荧光免疫层析检测试剂盒及制备方法，包括干燥剂、密封袋和检测卡。所述检测卡包括扣卡与试剂条；所述试剂条包括样品垫、结合垫、滤血膜、硝酸纤维素膜、吸水纸和PVC底板，所述结合垫包被有氧化低密度脂蛋白抗体；所述氧化低密度脂蛋白抗体为氧化低密度脂蛋白单克隆抗体、多克隆抗体、抗体片段或嵌合抗体的一种或多种配对组合。本发明方法具有操作简便、检测效率高，检测成本低、灵敏度高、特异性强等突出优点，有重要的实用意义。

技术领域

本发明涉及临床医学检验领域，具体地说，涉及一种氧化低密度脂蛋白荧光免疫层析检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

心血管类疾病已成为人类“第一杀手”，目前全球每年有1700万人死于心血管疾病，约占全球死亡人数的1/3，预计到2020年这个数字将突破2000万。由于心血管疾病患者人数众多，因此相关诊断产品的市场空间很大，及时和早期的诊断对患者的预后将产生积极的影响。

氧化低密度脂蛋白是天然低密度脂蛋白经氧化修饰形成的。通常情况下，低密度脂蛋白以非氧化状态存在，当人体内氧化修饰的低密度脂蛋白过量时，它携带的胆固醇便积存在动脉壁上，久了容易引起动脉硬化。众多研究表明氧化低密度脂蛋白可作为心血管疾病风险预测和早期诊断的独立生物标记物。因此，准确检测血液中氧化低密度脂蛋白含量对心血管疾病的预防、检测及早期诊断意义重大。

目前，现有技术存在以下不足：(1)心血管病患病风险预测通常采用传统指标为血糖、血脂和血压相关指标，采用传统方法包括心脏超声检查、X光片检查等进行检测，这些一定是患者情况非常严重了，才会被检测到，无法达到早期诊断和预测疾病的效果。(2)中国发明专利CN201610219116.3公开了一种人氧化低密度脂蛋白的酶联免疫法检测试剂盒，该检测方法次存在在判断准确度不高、易出现假阳性、检测耗时长、操作复杂的问题。(3)中国实用新型专利CN201520050545.3公开了一种人氧化低密度脂蛋白的免疫比浊检测试剂盒，该检测方法存在需要特制仪器，造成仪器投资成本高、试剂成本高、测试速度慢、灵敏度低等缺点。

发明内容

本发明的目的在于解决现有技术的不足，提供一种氧化低密度脂蛋白荧光免疫层析检测试剂盒。

本发明的另一个目的是提供一种氧化低密度脂蛋白荧光免疫层析检测试剂盒的制备方法。

本发明的目的可通过采用以下技术方案予以实现：

一种氧化低密度脂蛋白荧光免疫层析检测试剂盒包括检测卡、干燥剂和密封袋，所述检测卡包括扣卡和试剂条；所述试剂条包括样品垫、结合垫、滤血膜、硝酸纤维素膜、吸水纸和PVC底板，所述结合垫包被有荧光微球标记的氧化低密度脂蛋白抗体。

所述的荧光微球的粒径范围为50nm-500nm。

所述的荧光微球选自荧光素cy5、荧光素cy7、含铕聚苯乙烯微球、2-甲氧基荧光增强素、罗丹明、藻红蛋白中的一种。

所述氧化低密度脂蛋白抗体为抗氧化低密度脂蛋白单克隆抗体、多克隆抗体、抗体片段或嵌合抗体的一种或多种配对组合。

氧化低密度脂蛋白荧光免疫层析检测试剂盒的制备方法，包括如下步骤：

(1)样品垫的制备：将玻璃纤维素膜用含有2％BSA、0.1MNaCl和表面活性剂，pH7-8的缓冲液浸泡，于4℃浸泡4小时，然后置于烘箱中，37℃干燥8小时即可。

(2)结合垫的制备：在步骤(1)制得的样品垫上均匀的铺上荧光微球标记的氧化低密度脂蛋白抗体溶液，真空冷冻干燥后密封，室温保存备用。

(3)滤血膜的制备：将滤血膜裁剪成10cm×5mm每条。

(4)包被有检测线和质控线的硝酸纤维素膜的制备：