[发明专利]基于免疫检查点抑制剂的纳米组装体及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种聚赖氨酸骨架接枝1-甲基-D-色氨酸的聚合物，其特征是，结构式如下：

，该聚合物的数均分子量为2000~6000，m与n比为1:8~15。

2.一种权利要求1所述的聚合物的制备方法，其特征是，采用叔丁氧羰基将1-甲基-D-色氨酸的氨基进行保护获得Boc-1-mt，Boc-1-mt的羧基与聚赖氨酸的部分伯胺基团进行缩合反应获得Boc-1-mt-PLL，将Boc-1-mt-PLL中的叔丁氧羰基脱除，获得聚赖氨酸骨架接枝1-甲基-D-色氨酸的聚合物。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征是，对氨基进行保护的步骤为：将1-甲基-D-色氨酸、NaHCO₃和二碳酸二叔丁酯溶解后，将溶液冷却至-1~0℃，然后升温至室温进行反应，反应后获得Boc-1-mt。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征是，溶解采用的溶剂为水与四氢呋喃的混合物。

5.如权利要求4所述的制备方法，其特征是，水与四氢呋喃的体积比为1:0.9~1.1。

6.如权利要求3所述的制备方法，其特征是，溶液冷却至-1~0℃，并保温9~11min。

7.如权利要求3所述的制备方法，其特征是，升温至室温，在室温下进行反应的时间为22~26h。

8.如权利要求3所述的制备方法，其特征是，反应结束后，去除溶剂获得含有产品的水溶液，向水溶液中添加盐酸至pH为1.0~1.1，采用乙酸乙酯进行萃取，去除水层获得乙酸乙酯层，将乙酸乙酯去除后获得Boc-1-mt。

9.如权利要求2所述的制备方法，其特征是，进行缩合反应的步骤包括：

将N-羟基琥珀酰亚胺、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐和Boc-1-mt进行反应获得活性中间酯；

将聚赖氨酸溶液的pH调节至10，然后加入所述活性中间酯，再调节pH至10，进行反应获得Boc-1-mt-PLL。

10.如权利要求9所述的制备方法，其特征是，获得活性中间酯的过程为：将N-羟基琥珀酰亚胺、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐溶解与无水N,N-二甲基甲酰胺中，然后加入Boc-1-mt，室温下反应3.5~4.5h，获得Boc-1-mt-NHS ester1。

11.如权利要求9所述的制备方法，其特征是，聚赖氨酸与Boc-1-mt的质量比为1:0.6~1.2。

12.如权利要求9所述的制备方法，其特征是，聚赖氨酸与Boc-1-mt的质量比1:0.9。

13.如权利要求9所述的制备方法，其特征是，聚赖氨酸溶液的溶剂为N,N-二甲基甲酰胺和水的混合物。

14.如权利要求13所述的制备方法，其特征是，N,N-二甲基甲酰胺和水的体积比为1:1。

15.如权利要求9所述的制备方法，其特征是，获得Boc-1-mt-PLL的反应时间为40~50h。

16.如权利要求2所述的制备方法，其特征是，将反应后的含有Boc-1-mt-PLL的物料依次用等体积比的N,N-二甲基甲酰胺和水的混合溶液和去离子水进行透析，透析液通过0.45mm膜过滤，然后冻干得目标产物Boc-1-mt-PLL。

17.如权利要求2所述的制备方法，其特征是，脱除叔丁氧羰基的步骤为：Boc-1-mt-PLL在室温下溶解在三氟乙酸/二氯甲烷混合溶液中，室温反应，用去离子水水透析后通过冷冻干燥。