[发明专利]一种用于抗精神病药物用药指导的多重基因检测试剂盒及其使用方法

说明书

本发明公开了一种用于抗精神病药物用药指导的多重基因检测试剂盒及其使用方法。本发明采用多重PCR结合片段长短/质量分析方法，同步快速定性检测与抗精神病药物代谢、转运、靶点作用相关的CYP2D6、MC4R、CYP1A2、CYP3A5、EPM2A、和SLC6A2等6个基因上7个单核苷酸多态性(SNP)位点。检测步骤：(1)采集口腔脱落细胞保存于细胞采集卡，或采集血液样本并提取核酸；(2)采用步骤1所述细胞采集卡或核酸为模板进行多重PCR扩增；(3)按PCR产物片段长短/质量同步分离7个SNP位点、3个人类DNA内参基因及1个PCR反应内参的PCR产物；(4)结果分析判读。本发明的优势是快速、灵敏度高、重复性好、特异性强、通量高、成本低。

技术领域

本发明涉及一种多重基因检测试剂盒，具体涉及一种用于抗精神病药物用药指导的多重基因检测试剂盒及其使用方法。

背景技术

随着我国社会经济的快速发展和竞争压力的不断加大，精神疾病发病率逐年提高。我国精神疾病患病率约为17％。精神分裂症 (schizophrenia)是最严重的精神疾病之一，世界各地人群中的发病率约为1％。精神分裂症具有多种复杂临床表现，以基本个性改变，思维、情感、行为之间不协调，精神活动与现实脱离为主要特征。精神分裂症不仅给患者本人及其家属带来极大的痛苦，而且也给家庭、医疗系统以及整个社会带来沉重的经济负担。

精神分裂症的发病机制与脑内多巴胺(dopamine，DA)和5-羟色胺(5-hydroxytryptamine，5-HT)功能增强有关。目前抗精神病药物(antipsychotic agents)是治疗精神分裂症最主要的治疗手段，但是抗精神病药物的疗效存在巨大的个体差异。药物基因组研究显示，药物个体差异大的最主要原因是患者的基因多态性。在神经递质系统中有大范围的药物靶点，编码这些蛋白的DNA多态性可以改变神经递质和酶的功能与表达水平，以及药物受体和转运体的结合特点，从而使不同个体对药物的反应存在差异。

人类基因组80％以上基因多态性都是单核苷酸多态性(Single Nucleotidepolymorphism，SNP)。SNP指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性，包括碱基转换、颠换、缺失和插入。大部分抗精神病药物都经CYP2D6代谢。CYP2D6基因SNP位点发生突变可使酶活性发生变化，导致药物前体或中间活性产物浓度过高或过低，从而使患者疗效不佳，甚至发生严重毒副反应。与药物转运和药物靶点作用相关的SNP位点发生突变也对药物反应有重要影响。目前，神经精神药理学药物监测治疗共识指南(2017)和pharmGKB数据库已公布了部分抗精神病药物的代谢、转运和靶点基因。通过对药物代谢、转运和靶点相关的SNP位点进行检测，可判断患者对不同药物的反应，为患者量身定制一套用药方案，提高治疗效率，减轻患者医疗负担和痛苦，节省大量医院及社会资源(见表1)。

表1抗精神病药物用药相关基因

目前市场上，SNP分型检测技术主要有三种：测序法、荧光定量 PCR法、基因芯片法。

(1)荧光定量PCR法

荧光定量PCR采用荧光淬灭及双末端标记技术，针对SNP位点设计特异性的探针，具有灵敏度高、准确性高和特异性高等优势。但荧光定量PCR通量低，若要同时检测多个个SNP位点，需要分管检测，操作复杂，样品用量大，难以适应临床需求。此外，荧光定量 PCR难以设置内参质控，无法避免假阳性和假阴性。

(2)基因芯片法

基因芯片是通过微加工技术，将数以万计的特定序列的DNA片段(基因探针)有规律地排列固定于硅片、玻片等支持物上，构成的一个二维DNA探针阵列利用这类芯片与标记的生物样品进行杂交，可对样品的基因表达谱生物信息进行快速定性和定量分析。其优点是通量高、操作简便；缺点是检测成本昂贵、重复性差、灵敏度较低。芯片的种类较多，难以制定一个统一的质量控制标准也限制了基因芯片技术的普及。

(3)测序法