[发明专利]一种莼菜多糖的提取方法

说明书

本发明涉及莼菜多糖制备技术领域，为制备高纯度的莼菜多糖，公开了一种莼菜多糖的提取方法，将莼菜清洗后经低浓度氢氧化钠溶液浸泡脱胶，然后脱脂，再纤维素酶酶解，然后热水水提得到粗多糖溶液，加乙醇含量85～90wt%醇沉得粗多糖，然后将粗多糖分离并冷水冲洗后分散溶于10～15倍的热水中，超声处理，加氯仿和正丁醇脱蛋白，再超声处理后超滤膜过滤，然后加乙醇至含量为70～80wt%醇沉、洗涤、减压干燥得到灰白色胶状的莼菜多糖。本发明的莼菜多糖提取方法得到的莼菜多糖的纯度高，提取效率高，且以水溶性多糖为主，具有较高的生物活性。

技术领域

本发明涉及莼菜多糖制备技术领域，具体涉及一种莼菜多糖的提取方法。

背景技术

莼菜别名马蹄草、屏风、莼菜、胡菜等，是亚纲睡莲科莼菜属多年生淡水水生草本植物，生长于池塘、湖泊和沼泽中，主要分布于浙江、江苏、湖南和四川等地，是可供食用的稀有名贵蔬菜，其中以杭州西湖莼菜最为著名，且具《本草纲目》记载，莼菜具有清热、利水、消肿、治热痢、黄疸等功效，明朝时期便是宫廷贡品。

新鲜的莼菜中含水量达97％，余下含1％的多糖、0.76％的蛋白质以及丰富的氨基酸、微量元素和脂质物。莼菜所含多糖经研究主要有三种，分别是碱溶性多糖、水溶性多糖酸和酸溶性多糖，碱溶性多糖主要是体外多糖，即包裹在嫩芽外的透明胶质，含量最多，可经碱液如氢氧化钠、碳酸氢钠提取得到，酸溶性多糖和水溶性多糖大多分布在莼菜细胞内或细胞间质间，酸溶性多糖可通过酸溶液如低浓度盐酸、有机弱酸等提取得到，水溶性多糖通过热水提取得到，莼菜多糖中碱溶性多糖的含量是水溶性多糖含量的3～4倍。

高纯度的莼菜多糖在降血糖、血脂、抗肿瘤抗氧化，增强机体免疫力等方面具有重要意义，但是多糖溶于水是其发挥生物活性的关键所在。现有研究也表明水溶性多糖的抗氧化能力和清除自由基能力大大高于碱溶性多糖，若达到相同效果，需要碱溶性多糖浓度为水溶性多糖的2.5倍，因此从莼菜中提取莼菜的水溶性多糖具有积极的意义。但现有对莼菜多糖的提取研究主要集中在碱溶性多糖的提取制备上，涉及水溶性多糖的还比较少。中国专利申请CN201410603567.8，专利名称一种莼菜多糖的提取方法，公开了如下的提取步骤：将莼菜粉先脱脂，然后加入氢氧化钠溶液混合振荡提取，再离心分离得到含莼菜多糖的上清液，如此重复四次，然后将得到的上清液合并得到含莼菜多糖的上清液。该方法主要是提取碱溶性多糖，可能夹带水溶性多糖，同时所得多糖未纯化分离，多糖的纯度低，影响多糖活性的发挥。因此，有必要研究如何进一步制备纯度较高，且以水溶性多糖为主的莼菜多糖，增强莼菜多糖的生物活性。

发明内容

为制备高纯度的莼菜多糖，本发明的目的在于提供一种莼菜多糖的提取方法，所得莼菜多糖的纯度高，而且以水溶性多糖为主。

本发明提供如下的技术方案：

一种莼菜多糖的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)清洗莼菜，在0.1～0.2mol/L氢氧化钠溶液中5～10℃浸泡、过滤、水洗、干燥，然后粉碎得莼菜粉；

(2)将莼菜粉浸渍于无水乙醇中，50～60℃旋转回流脱脂得脱脂莼菜粉；

(3)向脱脂莼菜粉中加纤维素酶溶液或果胶酶溶液或木瓜蛋白酶溶液50～60℃酶解处理，灭酶活性，离心得到酶解清液；

(4)浓缩酶解清液，与10～15倍体积热水混合提取得粗多糖溶液，加乙醇至乙醇含量85～90wt％醇沉得粗多糖；

(5)将粗多糖分离并冷水冲洗后，分散溶于10～15倍的热水中，超声处理，加入氯仿和正丁醇混合试剂搅拌混合，氯仿和正丁醇混合试剂与热水的体积比为1:1，然后离心去除不容杂质，得到离心液；

(6)将离心液加热至40～50℃，然后继续超声处理，再用超滤膜超滤，保留截留液；