[发明专利]源于草酸青霉的黑麦酮酸K及在抑制癌细胞增殖上的应用

说明书

本发明涉及一种源于草酸青霉的黑麦酮酸K及在抑制癌细胞增殖上的应用。该化合物具有抑制人癌细胞增殖作用。其结构式为：。通过发酵培养草酸青霉(Penicillium oxalicum)IBPT‑6，获取发酵物，然后从发酵物中分离纯化出该化合物。经实验证实，该化合物对癌细胞具有较好的抗肿瘤活性。可用于制备癌细胞增殖抑制药物或抗肿瘤药物。

技术领域

本发明涉及一种源于草酸青霉的黑麦酮酸类化合物Secalonic acid K及其抑制人癌细胞增殖方面的应用，属于生物医药领域。

背景技术

黑麦酮酸类化合物（Secalonic acids）属于麦角色素类（Ergochrome）次生代谢产物，为氧杂蒽酮二聚物。自从 Stoll 等在 1952 年从真菌中分离得到黑麦酮酸 A（Secalonic acid A）之后，该系列的化合物黑麦酮酸（A-I）就不断地被发现及研究。黑麦酮酸类化合物具有各种不同的生理活性，以黑麦酮酸D（Secalonic acid D, SAD）为例，5 mg/ml的 SAD加入到生理盐水中, 在5-20 mg范围内，即可以治疗早期膀胱癌，50-100 mg范围内，对更严重的膀胱癌有疗效并且没有副作用发生。经研究发现，一些海洋真菌能够在次级代谢过程中产生结构新颖、活性好的黑麦酮酸类化合物，具有很好的药用和产业化前景。

本发明人研究得知，草酸青霉 (Penicillium oxalicum) IBPT-6 (已于2013年12月25日保藏在中国典型培养物保藏中心，地址: 武汉 武汉大学，保藏编号是：CCTCC NO：M2013714) 发酵产物的粗提取物有很好的细胞增殖抑制活性，遂对其活性成分进行研究。研究发现所示黑麦酮酸类化合物具有抗人癌活性，目前尚未见该化合物对人癌细胞的增殖抑制活性的报道，因此市场上也尚未见有与此相关的药物。

发明内容

本发明的目的在于提供一种源于草酸青霉的黑麦酮酸类化合物Secalonic acidK及其抑制人癌细胞增殖方面的应用。该化合物具有抑制癌细胞增殖作用，具有抗癌活性。其结构式为：

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该化合物的制备方法，是通过发酵培养草酸青霉 (Penicillium oxalicum)IBPT-6，获取发酵物，然后从发酵物中分离纯化出该化合物。具体步骤如下：

1发酵生产

按培养微生物的常规方法，取草酸青霉 (Penicillium oxalicum) IBPT-6接种到PDA固体斜面培养基上在28℃培养箱中培养2至3天，然后接种到培养液中，28℃静止培养30天后，获得菌丝体和发酵液；所述培养液组成：每升水含甘露醇20.0 g、酵母膏3.0 g、麦芽糖20.0 g、味精10.0 g、葡萄糖10.0 g、KH₂PO₄ 0.5 g、MgSO₄·7H₂O 0.3 g、NaCl 15.0 g。

2 浸膏的获得

用纱布将菌丝体和发酵液分离。菌丝体用丙酮溶液（含20%~30%水）连续超声破壁3次，过滤去除残渣，得到含丙酮和水的菌丝体粗提物。减压浓缩去除丙酮，得到粗提物的水溶液，再以体积比1:2加入乙酸乙酯萃取3次，得乙酸乙酯粗提液，减压浓缩至近干得菌丝体浸膏36.5 g。

3 化合物的分离精制