[发明专利]一种提高脱落酸固体发酵产量的方法在审

专利信息
申请号: 201910347495.8 申请日: 2019-04-25
公开(公告)号: CN109988785A 公开(公告)日: 2019-07-09
发明(设计)人: 郑珩;余永柱;张彦 申请(专利权)人: 南京广方生物科技有限公司
主分类号: C12P7/42 分类号: C12P7/42;C12R1/645
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 211100 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 固体发酵 豆油 脱落酸 表面活性剂 发酵工程 工业应用 前体物质 生物合成 斜面培养 种子培养 司盘 吸收
【权利要求书】:

1.一种提高脱落酸固体发酵产量的方法,包括以下步骤:

第一步,将灰葡萄孢霉菌进行斜面培养3-5天,培养温度24-30℃;

第二步,经斜面培养的灰葡萄孢霉菌进行种子培养48-96小时,培养温度24-30℃;

第三步,经种子培养的灰葡萄孢霉菌进行固体发酵培养7-11天,培养温度24-30℃,培养时每千克培养基质中添加0.01-50g豆油以及0.001-10g表面活性剂,搅匀后静置培养;

第四步,发酵产物经有机溶剂提取,纯化后得到高产量的脱落酸。

2.根据权利要求1所述提高脱落酸发酵产量的方法,其特征在于:所述第一步中,斜面培养基采用PDA培养基。

3.根据权利要求1所述提高脱落酸发酵产量的方法,其特征在于:所述第二步中,种子培养基为PDA培养基,置于平皿中静置培养。

4.根据权利要求1所述提高脱落酸发酵产量的方法,其特征在于:所述第三步中,固体发酵培养基的组成为,每千克培养基含麸皮10-150g,秸秆粉10-150g,小米10-100g,葡萄糖5-50g,酵母粉5-50g,蛋白胨5-50g,CaCO310-100g,豆油0.01-50g以及表面活性剂0.001-10g,余量为水。

5.根据权利要求4所述提高脱落酸发酵产量的方法,其特征在于:所述表面活性剂为非离子型表面活性剂如月桂醇聚氧乙烯醚(AEO)、吐温-40、吐温60、司盘-20、司盘-80中的一种或几种,优选为司盘-80。

6.根据权利要求4所述提高脱落酸发酵产量的方法,其特征在于:所述豆油添加量为0.01-50g/kg,表面活性剂添加量为0.001-10g/kg。

7.根据权利要求1所述的提高脱落酸发酵产量的方法,其特征在于:将生长有灰葡萄孢霉菌的种子培养基以1%-10%的接种量接种至固体发酵培养基中,搅匀后静置培养。

8.根据权利要求1所述的提高脱落酸发酵产量的方法,其特征在于:发酵后的产物用乙醇浸泡,提取其中的脱落酸,过滤后收集提取液,浓缩至粘稠状液体,用热的乙酸乙酯溶解,冷却后结晶可得到脱落酸产品。

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