[发明专利]一种提高脱落酸固体发酵产量的方法在审
申请号: | 201910347495.8 | 申请日: | 2019-04-25 |
公开(公告)号: | CN109988785A | 公开(公告)日: | 2019-07-09 |
发明(设计)人: | 郑珩;余永柱;张彦 | 申请(专利权)人: | 南京广方生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P7/42 | 分类号: | C12P7/42;C12R1/645 |
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地址: | 211100 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 固体发酵 豆油 脱落酸 表面活性剂 发酵工程 工业应用 前体物质 生物合成 斜面培养 种子培养 司盘 吸收 | ||
1.一种提高脱落酸固体发酵产量的方法,包括以下步骤:
第一步,将灰葡萄孢霉菌进行斜面培养3-5天,培养温度24-30℃;
第二步,经斜面培养的灰葡萄孢霉菌进行种子培养48-96小时,培养温度24-30℃;
第三步,经种子培养的灰葡萄孢霉菌进行固体发酵培养7-11天,培养温度24-30℃,培养时每千克培养基质中添加0.01-50g豆油以及0.001-10g表面活性剂,搅匀后静置培养;
第四步,发酵产物经有机溶剂提取,纯化后得到高产量的脱落酸。
2.根据权利要求1所述提高脱落酸发酵产量的方法,其特征在于:所述第一步中,斜面培养基采用PDA培养基。
3.根据权利要求1所述提高脱落酸发酵产量的方法,其特征在于:所述第二步中,种子培养基为PDA培养基,置于平皿中静置培养。
4.根据权利要求1所述提高脱落酸发酵产量的方法,其特征在于:所述第三步中,固体发酵培养基的组成为,每千克培养基含麸皮10-150g,秸秆粉10-150g,小米10-100g,葡萄糖5-50g,酵母粉5-50g,蛋白胨5-50g,CaCO310-100g,豆油0.01-50g以及表面活性剂0.001-10g,余量为水。
5.根据权利要求4所述提高脱落酸发酵产量的方法,其特征在于:所述表面活性剂为非离子型表面活性剂如月桂醇聚氧乙烯醚(AEO)、吐温-40、吐温60、司盘-20、司盘-80中的一种或几种,优选为司盘-80。
6.根据权利要求4所述提高脱落酸发酵产量的方法,其特征在于:所述豆油添加量为0.01-50g/kg,表面活性剂添加量为0.001-10g/kg。
7.根据权利要求1所述的提高脱落酸发酵产量的方法,其特征在于:将生长有灰葡萄孢霉菌的种子培养基以1%-10%的接种量接种至固体发酵培养基中,搅匀后静置培养。
8.根据权利要求1所述的提高脱落酸发酵产量的方法,其特征在于:发酵后的产物用乙醇浸泡,提取其中的脱落酸,过滤后收集提取液,浓缩至粘稠状液体,用热的乙酸乙酯溶解,冷却后结晶可得到脱落酸产品。
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