[发明专利]一种提取高三尖杉酯碱的方法

说明书

本发明公开了一种提取高三尖杉酯碱的方法，该方法以该方法以经干燥粉碎的粗榧原料，用甲醇氯仿混合液浸提，过滤，滤液浓缩得浸膏，经氯仿沉淀，过滤，滤液于65～70℃下浓缩得高三尖杉酯碱粗品，高三尖杉酯碱粗品通过反相柱层析、浓缩、萃取、重结晶分离提纯得高三尖杉酯碱成品，高三尖杉酯碱含量大于98%；本发明方法简单易操作，生产周期短，成本低，得率高，适于工业化应用和市场推广。

技术领域

本发明涉及一种从干燥的粗榧树皮中提取高三尖杉酯碱的工业化生产方法。

背景技术

高三尖杉酯碱（Homoharringtonine）为从三尖科植物三尖杉或其同属植物中得到的生物碱；对3H标记的门冬酰胺掺入蛋白质有抑制作用，对3H标记的胸腺嘧啶核苷掺入DNA也有影响；高三尖杉酯碱还能诱导细胞分化，提高cAMP的含量，抑制糖蛋白合成；电子显微镜下可以看到染色质向核边缘集中、浓缩，形成染色体团块向核外膨出，发展成为核分离的“凋落小体”，最后核碎裂。

高三尖杉酯碱对动物转移性白血病P-388、L-1210有抑制作用。临床上三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱配合其它中药治疗各种类型白血病均有较好疗效，对白血病治疗缓解率高达82%。目前对非淋巴性白血病主要采取以三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱为主的联合化疗治疗方案，经多年临床证明，疗效显著；同时，三尖杉酯碱还可用于治疗黑素瘤、肺癌、乳腺癌、脑肿瘤等；因此，三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱被列入全世界36种抗癌药物之列。

三尖杉科三尖杉属植物共9种，其中8种产于我国；此属植物中含有多种生物碱，即三尖杉酯碱、高三尖杉酯碱、异三尖杉酯碱及脱氧三尖杉酯碱；三尖杉酯类碱具有显著的抗癌作用，由于它的使用价值和经济价值，近年来国内外对该属植物的化学、药理和临床等方面进行了一系列的研究工作，争相开发，已从三尖杉属植物中提取分离出了三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱供临床应用；但由于三尖杉植物资源有限，其中有抗癌活性的酯类生物碱的含量又极低，所以远不能满足临床需要；目前，我国主要是用海南粗榧或中国粗榧和三尖杉这几种树为原料，从中提取有效成分供临床使用；由于树木的大量采伐，导致数种濒临枯危，而且严重破坏生态平衡。因此，寻找新的三尖杉酯类碱植物资源、开发新的三尖杉生物碱生产提纯分离技术、提高有限资源的利用率都有十分重要的意义。

高三尖杉酯碱提取现有技术或传统方法中存在如下问题：

（1）高三尖杉酯碱（Homoharringtonine）在自然界中存在量极低，且含大量杂质，提取难度大；

（2）目前，高三尖杉酯碱的提取方法很多，部分方法虽然提取成品纯度高，但收率很低，生产量较小，无法推广工业化生产；即有部分提取方法能提高收率，却也因为操作要求高、控制复杂、工艺不成熟等原因，不利于放大与工业化生产；

（3）高三尖杉酯碱因为生产周期长，提取效率低，难以推广应用和规模化生产，而人工合成品难以获得理想的疗效；

（4）因为采用填料不同的问题，导致收率低、除杂效果差、产品在柱层析过程中降解等问题，不能很好的运用于规模化生产。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了一种提取高三尖杉酯碱的方法；该方法以经干燥粉碎的粗榧原料，用甲醇氯仿混合液浸提，过滤，滤液浓缩得浸膏，经氯仿沉淀，过滤，滤液于65～70℃下浓缩得高三尖杉酯碱粗品，高三尖杉酯碱粗品通过反相柱层析、浓缩、萃取、重结晶分离提纯得高三尖杉酯碱成品，高三尖杉酯碱含量大于98%；本发明方法简单易操作，生产周期短，成本低，得率高，适于工业化应用和市场推广。

本发明的目的通过如下技术方案实现：

（1）以干燥、粉碎的粗榧为原料，按质量体积比g:mL为1:3～5的比例在原料中添加工业级甲醇-氯仿混合液，在室温下浸提6～8h，过滤，滤渣继续加甲醇-氯仿混合液，重复浸提1～2次，合并滤液，浓缩至无回收液流出时得含高三尖杉酯碱的浸膏；

所述粉碎的粗榧粒径为10～20目；