[发明专利]一种高效生产XX♂雄性黄颡鱼的方法

说明书

本发明公开了一种高效生产XX♂雄性黄颡鱼的方法，以来曲唑逆转的XX♂雄性黄颡鱼与XX♀雌性黄颡鱼人工繁殖的子代在高温处理下，性别决定方式由遗传性别决定变为温度控制性别为主，具体方法为：从第7日龄到15日龄在32‑34℃培育，从第16日龄到60日龄在34℃培育，全雌黄颡鱼经高温处理后逆转为XX♂雄性黄颡鱼。该方法适用于工厂化温控生产雄性黄颡鱼苗，雄性逆转率高达99%，存活率高达95%。

技术领域

本发明属于鱼类遗传育种技术领域，具体涉及一种高效生产XX♂雄性黄颡鱼的方法，适用于工厂化温控生产雄性黄颡鱼苗和黄颡鱼全雌配套系生产。

背景技术

黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)隶属于鲇形目，鲿科，黄颡鱼属，是我国重要的淡水经济鱼类之一。近年来，我国科研人员对黄颡鱼生殖调控和品种改良进行了大量研究。由于黄颡鱼雄性比雌性生长快2-3倍，刘汉勤等^[1]通过性激素处理结合丹成等^[2]开发的黄颡鱼性别连锁分子标记成果筛选出YY超雄黄颡鱼。YY 超雄黄颡鱼与普通XX雌性黄颡鱼繁殖得到的XY全雄黄颡鱼。生产XY全雄黄颡鱼需使用雌激素来生产XY和YY生理雌性黄颡鱼，而农业部公布的NY 5071-2002《无公害食品渔用药物使用准则》规定了禁止雌激素在水产品中使用，此外各个家系的维持成本大。

大多数鱼类的性别决定为遗传性别决定，极少数鱼类存在遗传性别决定和环境性别决定共存的现象，如半滑舌鳎和银鲫，它们的后代性别比例容易受到温度的影响。目前还没有效的方法能够诱导鱼类从遗传性别决定到环境(温度)性别决定。Zhang等^[3]利用高温处理XY♂与XX♀繁殖的黄颡鱼仔鱼的性比接近1:1，高温对黄颡鱼的遗传性别决定几乎没有影响；而且野生和养殖群体中均未发现 XX♂伪雄鱼。目前普遍使用17α-甲基睾酮(MT)定向诱导鱼类性腺向精巢分化来生产伪雄鱼，但本实验室已研究了不同浓度的17α-甲基睾酮(MT)，发现MT不能逆转为功能性精巢，另外芳香化酶抑制剂来曲唑(LZ)处理黄颡鱼鱼苗并结合黄颡鱼性别连锁分子标记筛选发现仅20％左右的XX雌鱼逆转为雄性黄颡鱼^[4]，在后来的繁殖过程中发现伪雄黄颡鱼性腺存在退化现象，而且处理效果不稳定。本发明首次发现利用来曲唑(LZ)诱导的性逆转促使黄颡鱼从遗传性别决定向环境 (温度)性别决定转换，常温下XX雄性黄颡鱼和XX雌鱼交配的子一代全部为雌性；但高温32-34℃处理能够诱导出接近100％比例的XX雄鱼。

发明内容

本发明的目的在于提供了一种高效生产XX♂雄性黄颡鱼的方法，首次以来曲唑(LZ)逆转的XX♂雄性黄颡鱼与XX♀雌性黄颡鱼繁殖的XX子一代为研究对象，通过摸索温度处理梯度和处理时间，以最佳组合方式建立了高效生产XX♂雄性黄颡鱼的方法。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种高效生产XX♂雄性黄颡鱼的方法，包括以下步骤：

(1)来曲唑诱导：XX♀雌性黄颡鱼和XY♂雄性黄颡鱼人工繁殖的子代通过来曲唑诱导进行性逆转，分子标记筛选出XX♂雄性黄颡鱼；

(2)温度诱导：将上述方法获得的XX♂雄性黄颡鱼与XX♀雌性黄颡鱼进行人工繁殖，子代从第7日龄到15日龄在32-34℃培育，从第16日龄到60日龄在34℃培育，全雌黄颡鱼经高温处理后逆转为XX♂雄性黄颡鱼。

优选地，步骤(2)中子代从第7日龄到60日龄在34℃培育，雄性逆转率为高达99％。

优选地，步骤(2)中子代从第7日龄到15日龄在32℃培育，从第16日龄到60日龄在34℃培育，雄性逆转率为95％，存活率高达95.54％。

与现有技术相比，本发明具有以下优点及有益效果：