[发明专利]一种比率荧光检测系统及其构建方法、应用在审
申请号: | 201910350201.7 | 申请日: | 2019-04-28 |
公开(公告)号: | CN110161002A | 公开(公告)日: | 2019-08-23 |
发明(设计)人: | 汪晶;邱昱;李大权;胡军 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 杭州杭诚专利事务所有限公司 33109 | 代理人: | 尉伟敏;薄盈盈 |
地址: | 310014 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 比率荧光检测 构建 金簇 检测 氰离子 荧光 检测技术领域 柠檬酸 发红色荧光 牛血清蛋白 光稳定性 环境友好 金纳米簇 蓝色荧光 实时分析 荧光化学 准确度 可视化 灵敏度 强度比 修饰剂 乙二胺 可控 探针 修饰 应用 | ||
1.一种比率荧光检测系统,其特征在于,所述比率荧光检测系统包括红色金簇和蓝色碳点,所述比率荧光检测系统的pH控制在9~13,所述蓝色碳点与红色金簇的初始荧光强度比为(15~25):1;所述红色金簇为发红色荧光的牛血清蛋白修饰金纳米簇;所述蓝色碳点为发蓝色荧光的以柠檬酸为碳源、乙二胺为修饰剂的碳点。
2.根据权利要求1所述的一种比率荧光检测系统,其特征在于,
所述红色金簇按照以下步骤制得:
(a)将氯金酸溶于去离子水中,在37~40℃下剧烈搅拌,得氯金酸溶液;以四氯金酸质量为基准,所述去离子水的体积用量为0.25~0.30mL/mg;
(b)在搅拌条件下向步骤(a)得到的氯金酸溶液中加入牛血清蛋白得混合液,调节pH为11~12,在37~40℃下反应10~12h;所述牛血清蛋白与四氯金酸的质量比为(14.5~16.5):1;所述蓝色碳点按照以下步骤制得:将柠檬酸和乙二胺溶于去离子水中,高压密闭条件下180~200℃反应5~8h;所述柠檬酸、乙二胺、去离子水的质量比为(0.1~0.2):1:5。
3.根据权利要求1所述的一种比率荧光检测系统,其特征在于,所述比率荧光检测系统的pH控制在11~12。
4.根据权利要求1所述的一种比率荧光检测系统,其特征在于,所述红色金簇与蓝色碳点的初始荧光强度比为(18~20):1。
5.一种如权利要求1或2所述的比率荧光检测系统的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将红色金簇分散于碱性缓冲溶液中,得到金簇碱性溶液;
(2)将蓝色碳点加入到步骤(1)得到的金簇碱性溶液中,于5~37℃搅拌混合均匀,构建得到上述pH和初始荧光强度比的比率荧光检测系统。
6.根据权利要求5所述的比率荧光检测系统的构建方法,其特征在于,所述碱性缓冲溶液为pH为9~13的碳酸盐缓冲溶液;以红色金簇质量为基准,所述碳酸盐缓冲溶液的加入量为10~12mL/mg;以红色金簇质量为基准,所述蓝色碳点的加入量为5~9μg/mg;所述蓝色碳点和红色金簇的初始荧光强度比为(18~20):1。
7.根据权利要求5所述的比率荧光检测系统的构建方法,其特征在于,所述碱性缓冲溶液为pH为9~13的碳酸钠-氢氧化钠缓冲溶液;以红色金簇质量为基准,所述碳酸钠-氢氧化钠缓冲溶液的加入量为8~15mL/mg;以红色金簇质量为基准,所述蓝色碳点的加入量为4~11μg/mg;所述蓝色碳点和红色金簇的初始荧光强度比为(15~25):1。
8.根据权利要求5所述的比率荧光检测系统的构建方法,其特征在于,所述碱性缓冲溶液为pH为11~12的碳酸钠-氢氧化钠缓冲溶液;以红色金簇质量为基准,所述碳酸钠-氢氧化钠缓冲溶液的加入量为10~12mL/mg;以红色金簇质量为基准,所述蓝色碳点的加入量为5~9μg/mg;所述蓝色碳点和红色金簇的初始荧光强度比为(18~20):1。
9.一种如权利要求1-4任一所述的比率荧光检测系统在氰离子检测中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于:包括以下步骤:实时构建100μL浓度为0.1mg/mL的上述比率荧光检测系统,加入100μL终浓度区间为0~75μM的氰离子标准溶液作为检测液,混合均匀,静置10min后,在激发波长为365nm、狭缝宽度10nm条件下进行荧光检测。
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