[发明专利]色谱分析柱、检测假体关节感染的试剂盒及装置

说明书

本发明提供了一种色谱分析柱、检测假体关节感染的试剂盒及装置。该色谱分析柱包括：色谱柱管、填充于色谱柱管内的填料；以及与色谱柱管一体化设计的色谱柱尖，色谱柱管的内径为100～200μm。采用内径相对较宽的内径，能够使色谱柱管在提高色谱洗脱流速的时候维持柱压在正常压力范围内，提高了色谱分离的稳定性；同时也有利于增加样本的上样量，提高质谱检测的灵敏度。此外，采用一体化成型的色谱分析柱尖，洗脱时不存在拖尾现象，对蛋白的分离度更好。因此，采用本申请所改进的色谱分析柱对PIJ进行检测时，肽段分离度更好，稳定性更高，进而使得对目标蛋白的定量结果更准确。

技术领域

本发明涉及假体关节感染检测领域，具体而言，涉及一种色谱分析柱、检测假体关节感染的试剂盒及装置。

背景技术

关节假体术后感染(PJI，Prosthetic joint infections)是关节置换术后公认最严重的并发症之一，虽然PJI的发病率并不高，但自抗生素应用以来一直没有显著降低。据报道，髋和肩PJI 的发病率约为1％，膝PJI的发病率约为2％，肘PJI的发病率约为9％。而对于关节翻修术，PJI的发病率甚至高达40％；另外，导致全踝关节置换手术失败的并发症中有33％是PJI。

根据美国骨科医师协会、感染病学会和肌肉骨骼感染学会提出的诊断指南，大部分PJI 可以获得明确的诊断和及时的治疗。但是，也有一些临床表现不典型的病人，诊断十分困难。现有的诊断标准依据临床表现和实验室检查综合判断，后者包括红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate，ESR)、C反应蛋白(C-Reactive Protein，CRP)、细菌培养、关节液WBC 计数与分类等。这些指标在诊断PJI的特异性、敏感性方面仍存在一些不足：1)细菌培养是诊断PJI的“金”标准之一，但细菌培养阳性率为60％～70％左右，敏感性不够高。2)关节液白细胞计数与分类是诊断PJI的有效方法，但全身炎症性关节炎病人关节置换后，该指标也会升高，特异性不强。3)现有实验室诊断方法，无法做到即时诊断(Point ofCare Testing，POCT，或称床边诊断)。

因此，如何更准确地对PJI进行检测，现有技术中仍无有效的解决方案。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种色谱分析柱、检测假体关节感染的试剂盒及装置，以提供一种适合利用质谱来对PJI进行检测的产品，从而提高检测的准确性。

为了实现上述目的，根据本发明的一个方面，提供了一种色谱分析柱，该色谱分析柱包括：色谱柱管，色谱柱管的内径为100～200μm；填充于色谱柱管内的填料；以及与色谱柱管一体化设计的色谱柱尖。

进一步地，色谱柱管的长度为100～300mm；更优选为100～150mm，最优为100mm；优选地，色谱柱尖的内径为2～8μm，更优选为3～6μm；优选地，填料为C18填料，更优选填料的粒径为1.5～2.5μm，进一步优选为1.8～2.2μm；优选地，色谱柱管的内径为120μm～180μm，更优选为150μm；优选地，色谱柱管的外径为355～365μm，优选为360μm。

为了实现上述目的，根据本发明的一个方面，提供了一种检测假体关节感染的试剂盒，试剂盒包括上述任一种色谱分析柱。

进一步地，试剂盒还包括重同位素标记的标准肽段，优选地，标准肽段包含来源于蛋白髓性细胞核分化抗原蛋白和成髓细胞素蛋白的肽段序列；更优选地，来源于蛋白髓性细胞核分化抗原蛋白的肽段序列为SEQ ID NO:1和/或SEQ ID NO:2；更优选地，来源于成髓细胞素蛋白的肽段序列为SEQ ID NO:3和/或SEQ ID NO:4。

进一步地，重同位素标记位于标准肽段的C-末端的氨基酸上。

进一步地，重同位素标记的标准肽段位于同一试管中；优选地，试管中每一条标准肽段的浓度为100～200fmol，更优选为100～150fmol，进一步优选为100～100fmol。