[发明专利]以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖-三赞胶的方法

权利要求书

1.以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖-三赞胶的方法，是将鞘氨醇单胞菌（Sphingomonas sp.）CGMCC No.1650接种到灭菌后且含有碳源、氮源及营养物质的培养液中；调节培养液的pH，进行通气发酵，将发酵结束后的发酵液进行沉降萃取得到纤维状三赞胶；其特征在于还包括如下工艺条件：

A、培养液中的碳源选用废糖蜜、废葡萄糖母液中的一种或其结合；氮源选用有机氮及无机氮组成的复合氮源；

B、通气发酵过程中压力为0.03MPa-0.05MPa，pH值=5.0-7.0，发酵过程中采用通风量及温度分段控制，自发酵开始至发酵20小时温度为32℃-34℃，自发酵20小时至发酵结束温度为28℃-31℃，自发酵开始至发酵30小时通风量逐渐增加，自发酵30小时至发酵结束通风量逐渐降低，发酵过程中的温度及通风量控制条件如下：

0-10小时：温度32℃-34℃，通风量0.2vvm-0.3vvm；

11-20小时：温度32℃-34℃，通风量0.4vvm-0.5vvm；

21-30小时：温度28℃-31℃，通风量0.7vvm-0.9vvm；

31-40小时：温度28℃-31℃，通风量0.6vvm-0.7vvm；

41-50小时：温度28℃-31℃，通风量0.2vvm-0.3vvm；

C、在通气发酵11-20小时及21-30小时分别补入占发酵液总质量1%-2%的碳源，所述的碳源选自废糖蜜、废葡萄糖母液中的一种或其结合；

发酵结束后的发酵液进行沉降萃取前进行预处理，预处理的工艺条件为：在发酵结束后的发酵液中加入质量百分比浓度为10%-20%的氢氧化钠或氢氧化钾溶液，加入量为每升发酵液加入固态氢氧化钠或氢氧化钾2-4克；

萃取时用有机酸或无机酸调节发酵液pH，使萃取液与发酵液的混合物的pH=0.5-4.0后将其升温至55℃-90℃，萃取得到纤维状三赞胶；

萃取后得到的纤维状三赞胶中加入强碱弱酸盐或二价碱调节pH=6.5-7.5后制成均匀的膏状物料。

2.根据权利要求1所述的以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖-三赞胶的方法，其特征在于所述的通气发酵过程中采用氢氧化钠、氢氧化钾、盐酸、磷酸、硫酸或磷酸盐调节发酵过程中的pH=5.0-7.0。

3.根据权利要求2所述的以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖-三赞胶的方法，其特征在于所述的氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸、硫酸或磷酸盐采用质量百分比浓度为10%-15%的溶液。

4.根据权利要求1所述的以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖-三赞胶的方法，其特征在于有机酸或无机酸选用柠檬酸、甲酸、丙酸、丁酸、辛酸、盐酸、硫酸、磷酸、硝酸、硼酸、碳酸中的一种或至少两种以上的混合物。

5.根据权利要求1所述的以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖-三赞胶的方法，其特征在于所述的有机氮及无机氮选自酵母膏、蛋白胨、豆粉及硝酸盐。

6.根据权利要求1所述的以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖-三赞胶的方法，其特征在于所述的将鞘氨醇单胞菌（Sphingomonas sp.）CGMCC No.1650经过扩大培养后，按照种子液：培养液为5%-20%的接种量接种于培养液中。

7.根据权利要求6所述的以鞘氨醇单胞菌为菌种生产微生物多糖-三赞胶的方法，其特征在于所述的扩大培养过程包括：

（1）将斜面菌种经扩大培养后制成一级种子；

（2）将一级种子经扩大培养后制成二级种子；

（3）将制成的二级种子接入灭菌后的培养液，进行通气发酵；

其中步骤（1）、（2）中一级种子及二级种子的培养条件为：接种量5%-20%,风量为0.2vvm-0.8vvm，温度32℃-34℃，种龄为20-30小时。