[发明专利]一种大规模生产黄芪毛状根的方法

权利要求书

1.一种大规模生产黄芪毛状根的方法，其特征是步骤如下：

（1）将经过挑选的黄芪种子灭菌处理后诱导无菌苗；

（2）将无菌苗的叶、根和茎转接至添加植物激素的MS培养基上，诱导愈伤组织；

（3）挑选出颜色最深、生长良好的愈伤组织，在筛选培养基上继代培养，获得米黄色、增殖快、性状稳定的黄芪毛状根A；

（4）将黄芪毛状根A置于18~21℃培育18~24d，在筛选培养基上多次继代，不断挑选颜色最深、性状最好的黄芪毛状根，逐步将温度提高培养，直至23~27℃，挑选获得黄芪毛状根B；

（5）将黄芪毛状根B进行大规模的气升式液体培养，收集烘干即为富含黄酮的黄芪毛状根。

2.如权利要求1所述大规模生产黄芪毛状根的方法，其特征是步骤（1）具体步骤为：用质量浓度为75%的乙醇溶液浸泡黄芪种子30~40s，然后无菌水洗涤2~3遍，再用质量浓度为0.1%的氯化汞溶液浸泡15~20min，无菌水清洗3~5遍，接种于MS固体培养基上，进行光照培养得到无菌苗，光照条件为2000~3000Lux，12~16h/d。

3.如权利要求1所述大规模生产黄芪毛状根的方法，其特征是步骤（2）具体步骤为：将步骤（1）所得无菌苗的叶、根和茎接种于添加了0.3~1.5mg/L 6-BA和0.5~1.5mg/L NAA的MS固体培养基上，避光培养。

4.如权利要求1所述大规模生产黄芪毛状根的方法，其特征是：步骤（3）和步骤（4）中所述筛选培养基均为添加了0.3~1.5mg/L 6-BA和0.5~1.5mg/L NAA的MS固体/液体培养基。

5.如权利要求1所述大规模生产黄芪毛状根的方法，其特征是：步骤（3）和步骤（4）中所述培养时光照条件均为2000~3000Lux，12h/d。

6.如权利要求4所述大规模生产黄芪毛状根的方法，其特征是：步骤（3）和步骤（4）采用筛选培养基进行继代培养时，采用固体培养和液体悬浮培养交叉进行培养。

7.如权利要求1所述大规模生产黄芪毛状根的方法，其特征是步骤（5）具体步骤为：将黄芪毛状根B进行大规模的气升式培养，气升式培养基为添加了3/4MS液体培养基，光照条件为2000~3000Lux，12h/d，充气量为0.2L/min；然后收集培养物在60-80℃下烘干12-20h，即得到黄芪毛状根。

8.如权利要求1-7之一所述大规模生产黄芪毛状根的方法，其特征是：所述MS液体/固体培养基中加入22~25g/L蔗糖、5.4~5.7g/L琼脂。