[发明专利]一种乙型肝炎病毒感染的乳鼠模型的构建方法与应用在审
申请号: | 201910356662.5 | 申请日: | 2019-04-29 |
公开(公告)号: | CN110199942A | 公开(公告)日: | 2019-09-06 |
发明(设计)人: | 任广立 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军南部战区总医院 |
主分类号: | A01K67/02 | 分类号: | A01K67/02;A61K49/00 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 林丽明 |
地址: | 510010 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 构建 乳鼠 乙型肝炎病毒感染 患者血清 乳鼠模型 感染 慢性HBV感染 动物模型 静脉采血 伦理问题 实验小鼠 高表达 高压水 尾静脉 小鼠眼 检测 成功 建模 小鼠 体温 应用 升高 注射 体内 科研 研究 | ||
1.一种乙型肝炎病毒感染的乳鼠模型的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1.提取高表达感染患者血清;
S2.排除实验小鼠自发感染HBV;
S3.高压水动力尾静脉法将患者血清注入小鼠体内,分别于注射后7、15、30d经小鼠眼内眦静脉采血检测HBs Ag、HBe Ag及HBV DNA浓度,若为阳性者则判定造模成功。
2.根据权利要求1所述构建方法,其特征在于,步骤S1的具体操作是先提取高表达HBV感染患者血清,室温放置2h,离心分离得到血清,采用荧光定量PCR测定血清HBV DNA浓度,若血清HBV DNA浓度大于105拷贝/mL,则判定血清制备成功。
3.根据权利要求1所述构建方法,其特征在于,步骤S2的具体操作是接种前3d,经小鼠眼内眦静脉采血,应用ELISA检测HBs Ag、HBe Ag,若检测结果均为阴性,则判定排除自发感染HBV。
4.根据权利要求1所述构建方法,其特征在于,步骤S3的具体操作是采用高压水动力尾静脉法将患者血清按小鼠体质量(g)的0.8%注入,以PBS稀释,分别于注射后7、15、30d经小鼠眼内眦静脉采血,离心收集血清上清,检测HBs Ag、HBe Ag及HBV DNA浓度,若为检测结果为阳性者则判定造模成功。
5.根据权利要求4所述构建方法,其特征在于,步骤S3中所述的离心条件为3000rpm离心5min。
6.权利要求1至5任一项所述构建方法在乙肝病毒感染机制研究中的应用。
7.权利要求1至5任一项所述构建方法在制备抗乙肝病毒的药物中的应用。
8.权利要求1至5任一项所述构建方法在抗肝炎药物评价中的应用。
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