[发明专利]一种改善养殖场圈舍环境的复合乳酸菌发酵液及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种改善养殖场圈舍环境的复合乳酸菌发酵液，其特征在于，所述复合乳酸菌发酵液由植物乳杆菌P-8、植物乳杆菌LP3、植物乳杆菌LP4、植物乳杆菌KT-Lp9以及干酪乳杆菌Zhang混合发酵制备而成，所述复合乳酸菌发酵液的活菌数≥2×10⁹CFU/ml，所述植物乳杆菌P-8，保藏号为CGMCC No.6312，所述植物乳杆菌LP3，保藏号为CGMCC No.14531，所述植物乳杆菌LP4，保藏号为CGMCC No.14533，所述植物乳杆菌KT-Lp9，保藏号为CGMCC No.12950，所述干酪乳杆菌Zhang，保藏号为，CGMCC No.5469；

在混合发酵前，各菌种的重量配比为植物乳杆菌P-8∶植物乳杆菌LP3∶植物乳杆菌LP4∶植物乳杆菌KT-Lp9∶干酪乳杆菌Zhang＝(1-5)∶(1-5)∶(1-5)∶(1-5)∶(1-5)，各菌种的活菌数各自均≥10¹⁰CFU/ml。

2.一种制备权利要求1所述复合乳酸菌发酵液的方法，其特征在于，所述方法包括：

步骤1，分别将5株发酵菌种单独进行高密度发酵，得到一级种子液；

步骤2，将步骤1得到的一级种子液分别进行二次活化，得到二级种子液；

步骤3，将步骤2得到的二级种子液分别进行发酵，得到五种中间发酵液；

步骤4，将步骤3得到的中间发酵液混合接种于同一培养基中发酵，得到复合发酵液。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述方法包括：

步骤1，分别取一环活化后的植物乳杆菌P-8、植物乳杆菌LP3、植物乳杆菌LP4、植物乳杆菌KT-Lp9、干酪乳杆菌Zhang的斜面菌体，分别接种至MRS培养基中进行培养，得到五种一级种子液，其中，培养条件为：温度30-37℃，转速50-100rpm，培养18-36h；

步骤2，将步骤1培养得到的一级种子液按接种量3％-10％(v/v)重新转接入MRS培养基进行二次活化，得到五种二级种子液，其中，活化时间为18-24h；

步骤3，将步骤2得到的二级种子液分别按照接种量2-10％(v/v)接入到各自的发酵罐培养基中，分别得到植物乳杆菌P-8中间发酵液、植物乳杆菌LP3中间发酵液、植物乳杆菌LP4中间发酵液、植物乳杆菌KT-Lp9中间发酵液、干酪乳杆菌Zhang中间发酵液，其中，发酵条件为：温度30-37℃，转速50-100rpm，通风量0.3-1L/min，发酵全程调节发酵液pH值5.2-6.5，培养12-36小时；

步骤4，将5种中间发酵液按照不同体积比混合接种量2-10％(v/v)统一接种到统一发酵罐培养基中，温度均为30-37℃，转速均为50-100rpm，通风量均为0.3-1L/min，发酵全程保持发酵液pH值＝5.2-6.5，培养48-72小时，得到复合乳酸菌发酵液。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，步骤3制得的所述植物乳杆菌P-8中间发酵液、植物乳杆菌LP3中间发酵液、植物乳杆菌LP4中间发酵液、植物乳杆菌KT-Lp9中间发酵液以及干酪乳杆菌Zhang中间发酵液的中活菌数各自均≥10¹⁰CFU/ml。

5.权利要求1所述复合乳酸菌发酵液用于制备养殖场圈舍环境改善剂的用途。

6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于，向养殖场圈舍喷洒所述复合乳酸菌发酵液或其稀释液。