[发明专利]一种索玛鲁肽的合成方法

说明书

本发明公开了一种索玛鲁肽的合成方法，该方法包括：分别合成索玛鲁肽全保护S1‑S2片段、S3‑S6片段，用于合成索玛鲁肽树脂，并经裂解、纯化得到索玛鲁肽。选用Fmoc‑Lys(Dde)‑OH时，大大降低了合成索玛鲁肽粗品的成本。选用S19‑S20多肽片段或S18‑S20多肽片段接入主链，有利于完成索玛鲁肽主链的偶联，大大提高了索玛鲁肽粗品的纯度和收率，降低合成成本。采用二肽加四肽片段偶联的策略大大降低了D‑His消旋杂质、+Gly杂质、D‑Thr杂质、D‑Phe杂质的产生，极大的降低了产品纯化的难度，提高了收率，具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明涉及多肽固相合成领域，特别涉及一种索玛鲁肽的固相合成方法。

技术背景

胰高血糖素样肽-1(GLP-1)是由人肠道L细胞分泌的一种肽类激素，能够促进胰岛素的 分泌、抑制胰高血糖素的分泌，具有降低血糖浓度的功效，被用于II型糖尿病的治疗。然 而天然GLP-1在体内不稳定，易被二肽基肽酶-IV(DPP-IV)快速降解。

索玛鲁肽，英文名称为Semaglutide，是由丹麦诺和诺德公司开发生产的一种新型长效 胰高血糖素样肽-1(GLP-1)类似物，用于治疗II型糖尿病。索玛鲁肽具有降血糖、减肥和保 护心血管的功效，已于2017年12月获得FDA批准上市。索玛鲁肽的Lys侧链经PEG、Glu和十八碳二羧酸修饰后，亲水性大大提高、与白蛋白的结合力增强；同时N端第2位的Ala 突变为Aib后，有效的避免了被DPP-IV酶解而失活，半衰期达到40h，患者每周只需注射 一次，目前该药物的口服剂型也正在研制当中。索玛鲁肽的CAS号为910463-68-2，分子式 为C187H291N45O59，分子量为4113.64g/mol，肽序列为：

H-¹His-²Aib-³Glu-⁴Gly-⁵Thr-⁶Phe-⁷Thr-⁸Ser-⁹Asp-¹⁰Val-¹¹Ser-¹²Ser-¹³Tyr-¹⁴Leu-¹⁵Glu-¹⁶Gly-¹⁷Gln -¹⁸Ala-¹⁹Ala-²⁰Lys(Octadecanedioic-γ-Glu-PEG-PEG)-²¹Glu-²²Phe-²³Ile-²⁴Ala-²⁵Trp-²⁶Leu-²⁷Val-²⁸Arg-²⁹Gly-³⁰Arg-³¹Gly-OH。

目前已报道的索玛鲁肽的制备方法大致分为两类：一类是把含有侧链的Lys作为片段直 接接入索玛鲁肽主链完成合成，专利CN104356224A公开了一种采用液相法在Lys的ε-N H2 上接上侧链，随后在树脂上逐步缩合氨基酸制备索玛鲁肽的方法。另一类是分别逐个完成索 玛鲁肽主链和侧链的偶联，专利CN 201511027176公开了在固相逐步合成索玛鲁肽主链肽， 合成侧链修饰基团，脱去Lys的保护基，并偶联侧链修饰基团，最终裂解得到该多肽产物。 由于索玛鲁肽的序列较长且有较多的疏水氨基酸，采用氨基酸逐步缩合的方法合成时，易形 成折叠，导致树脂收缩严重，延长反应时间，进而粗肽中产生较多与产品性质极为接近的杂 质，如D-His的消旋杂质：

H-D-His-Aib-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys(Oct adecanedioic-γ-Glu-PEG-PEG)-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-OH；