[发明专利]II型草鱼呼肠孤病毒的微滴式数字PCR检测试剂盒及其专用引物和探针在审
| 申请号： | 201910361643.1 | 申请日： | 2019-04-30 |
| 公开（公告）号： | CN109971890A | 公开（公告）日： | 2019-07-05 |
| 发明（设计）人： | 王浩;唐睿哲;闻金萱 | 申请（专利权）人： | 上海海洋大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海伯瑞杰知识产权代理有限公司 31227 | 代理人： | 周一新 |
| 地址： | 201306 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 专用引物 探针 呼肠孤病毒 检测试剂 数字PCR 草鱼 微滴 淬灭基团 内参基因 荧光基团 传统PCR 靶分子 单拷贝 检测 | ||
【权利要求书】：
1.II型草鱼呼肠孤病毒的微滴式数字PCR专用引物和探针，其特征在于，所述专用引物和探针如下：
JX02-M-F：5'-CGAGAATAGATGCAGTGGACG-3'，
JX02-M-R：5'-CACAAATAACCCTTCTCCCGT-3'，
JX02-M-P：5'-荧光基团-TATAGTCGATGACCAGAGG-淬灭基团-3'；
其中，所述荧光基团为VIC，所述淬灭基团为BHQ-X。
2.II型草鱼呼肠孤病毒的微滴式数字PCR检测试剂盒，其特征在于，包含权利要求1所述的微滴式数字PCR专用引物和探针，还包括阳性对照和阴性对照。
3.根据权利要求2所述的II型草鱼呼肠孤病毒的微滴式数字PCR检测试剂盒，其特征在于，所述阳性对照为II型草鱼呼肠孤病毒cDNA模板，所述阴性对照为无菌ddH2O。
4.权利要求2或3所述的II型草鱼呼肠孤病毒的微滴式数字PCR检测试剂盒用于检测II型草鱼呼肠孤病毒的方法，其特征在于，包括：
(1)获取如上所述的微滴式数字PCR专用引物和探针；
(2)提取待测样本、阳性对照和阴性对照的RNA并反转录；
(3)将步骤(2)所得RNA进行微滴式数字PCR扩增，获得反应液；
(4)对步骤(3)所得反应液进行微滴荧光信号分析扫描。
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