[发明专利]同步检测黄曲霉毒素、环匹阿尼酸、赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的免疫层析试纸条有效
申请号: | 201910364887.5 | 申请日: | 2019-04-30 |
公开(公告)号: | CN110108875B | 公开(公告)日: | 2022-09-20 |
发明(设计)人: | 李培武;唐晓倩;姜俊;张奇;张文 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院油料作物研究所 |
主分类号: | G01N33/558 | 分类号: | G01N33/558;G01N33/577;G01N33/58;G01N33/532 |
代理公司: | 湖北武汉永嘉专利代理有限公司 42102 | 代理人: | 乔宇 |
地址: | 430062 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 同步 检测 黄曲霉 毒素 环匹阿尼酸 曲霉 玉米 赤霉烯酮 免疫 层析 试纸 | ||
1.同步检测黄曲霉毒素、环匹阿尼酸、赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮混合污染的免疫层析试纸条,其特征在于:包括底板,底板的一面从上到下依次粘贴吸水垫、检测垫、金标垫和样品垫,相邻各垫在连接处交叠连接,所述检测垫以硝酸纤维素膜为基垫,硝酸纤维素膜上横向设有质控线和检测线,所述检测线位于质控线的下方,个数为四条,呈间隔分布,所述四条检测线上分别包被有黄曲霉毒素B1-牛血清白蛋白偶联物、环匹阿尼酸-卵清蛋白偶联物、赭曲霉毒素A-牛血清白蛋白偶联物和玉米赤霉烯酮-牛血清白蛋白偶联物,所述质控线包被有兔抗鼠多克隆抗体;所述金标垫横向喷涂有纳米金标记的抗黄曲霉毒素单克隆抗体、纳米金标记的抗环匹阿尼酸单克隆抗体、纳米金标记的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体和纳米金标记的抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体;所述抗环匹阿尼酸单克隆抗体由保藏编号为CCTCC NO.C201871的杂交瘤细胞株YTT-2分泌产生,所述抗环匹阿尼酸单克隆抗体的重链可变区序列如SEQ ID NO:3所示,轻链可变区序列如SEQ ID NO:4所示。
2.根据权利要求1所述的同步检测黄曲霉毒素、环匹阿尼酸、赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮混合污染的免疫层析试纸条,其特征在于:所述抗黄曲霉毒素单克隆抗体为由保藏编号为CCTCC NO.C201013的杂交瘤细胞株1C11分泌产生的抗黄曲霉毒素通用单克隆抗体,抗赭曲霉毒素A单克隆抗体由保藏编号为CCTCC NO.C201329的杂交瘤细胞株1H2分泌产生,抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体由保藏编号为CCTCC NO.C201328的杂交瘤细胞株2D3分泌产生。
3.根据权利要求1所述的同步检测黄曲霉毒素、环匹阿尼酸、赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮混合污染的免疫层析试纸条,其特征在于:所述的吸水垫长16~18mm,宽2~4mm;检测垫长25~30mm,宽2~4mm;金标垫长6~9mm,宽2~4mm;样品垫长12~18mm,宽2~4mm,相邻各垫的交叠长度为1~3mm;所述的吸水垫为吸水纸;所述的底板为纸板。
4.根据权利要求1所述的同步检测黄曲霉毒素、环匹阿尼酸、赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮混合污染的免疫层析试纸条,其特征在于:检测垫上每相邻两条检测线之间的间距为2-3mm,靠近质控线的检测线与硝酸纤维素膜上沿的间距为15~20mm,靠近质控线的检测线与质控线的间距为5~7mm。
5.根据权利要求1所述的同步检测黄曲霉毒素、环匹阿尼酸、赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮混合污染的免疫层析试纸条,其特征在于:所述检测垫上每厘米检测线所需的黄曲霉毒素B1-牛血清白蛋白偶联物的包被量为100~300ng;每厘米检测线所需的环匹阿尼酸-卵清蛋白偶联物的包被量为80~400ng;每厘米检测线所需的赭曲霉毒素A-牛血清白蛋白偶联物的包被量为100~300ng;每厘米检测线所需的玉米赤霉烯酮-牛血清白蛋白偶联物的包被量为100~300ng;每厘米质控线所需的兔抗鼠多克隆抗体的包被量为100~300ng。
6.根据权利要求1所述的同步检测黄曲霉毒素、环匹阿尼酸、赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮混合污染的免疫层析试纸条,其特征在于:所述金标垫中所用的纳米金的粒径为15~20nm;所述金标垫上每厘米喷涂长度所需的纳米金标记的抗黄曲霉毒素单克隆抗体的用量为100~200ng,所述的纳米金标记的抗环匹阿尼酸单克隆抗体的用量为100~200ng,所述的纳米金标记的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体的用量为100~200ng,所述纳米金标记的抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体的用量为200~400ng。
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