[发明专利]调味品中4-甲基咪唑的检测方法

说明书

本发明提供了一种调味品中4‑甲基咪唑的检测方法。该检测方法包括采用LC/MS/MS内标法对调味品中的4‑甲基咪唑进行检测。通过采用LC/MS/MS内标法对调味品中的4‑甲基咪唑进行检测，使得检测结果更准确。

技术领域

本发明涉及副食品检测领域，具体而言，涉及一种调味品中4-甲基咪唑的检测方法。

背景技术

现有的副食品中4-甲基咪唑的检测方法一般采用HPLC外标法，用于焦糖色的检测，检出限高，针对含量低的样品无法进行定性与定量。此外，回收率低，且受基质干扰严重，保留时间定性容易出现假阳性。

因此，仍需要对现有的副食品中的4-甲基咪唑的检测方法进行改进，以提高检测的准确性。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种调味品中4-甲基咪唑的检测方法，以解决现有技术中的检测方法准确性低的问题。

为了实现上述目的，本发明提供了一种调味品中4-甲基咪唑的检测方法，该检测方法包括：采用LC/MS/MS内标法对调味品中的4-甲基咪唑进行检测。

进一步地，以4-甲基咪唑-d₆作为内标，采用LC/MS/MS内标法对调味品中的4-甲基咪唑进行检测的步骤包括：以4-甲基咪唑-d₆作为内标，建立4-甲基咪唑的标准溶液工作曲线；利用标准溶液工作曲线对调味品中的4-甲基咪唑进行检测。

进一步地，以4-甲基咪唑-d₆作为内标，建立4-甲基咪唑的标准溶液工作曲线的步骤包括：以4-甲基咪唑浓度与4-甲基咪唑-d₆浓度的比值为横坐标，以4-甲基咪唑定量离子对的峰面积与4-甲基咪唑-d₆定量离子对峰面积的比值为纵坐标，建立4-甲基咪唑的标准溶液工作曲线。

进一步地，采用LC/MS/MS内标法对调味品中的4-甲基咪唑进行检测之前，检测方法还包括：制备调味品的待测样品的步骤，优选地，制备调味品的待测样品的步骤包括：向调味品中加入4-甲基咪唑-d₆，得到初混物；优选4-甲基咪唑-d₆与调味品的添加质量比为：(0.1～0.5)×10^-7：1；去除初混物中的基质干扰，得到待纯化液；对待纯化液进行柱层析，得到纯化液；对纯化液进行定容，得到调味品的待测样品。

进一步地，通过沉淀蛋白质和/或酶解淀粉的方式去除初混物中的基质干扰，得到待纯化液；优选地，采用甲醇沉淀蛋白质，采用淀粉酶酶解淀粉；优选地，调味品包括酱、酱油、蚝油及蚝汁中的任一种或多种。

进一步地，对待纯化液进行柱层析，得到纯化液的步骤包括：采用MCX固相萃取柱对待纯化液进行柱层析，得到纯化液；优选地，采用MCX固相萃取柱对待纯化液进行柱层析，得到纯化液之前，检测方法还包括对MCX固相萃取柱进行活化的步骤；更优选地，依次采用甲醇和水对MCX固相萃取柱进行活化。

进一步地，对待纯化液进行柱层析，得到纯化液的步骤包括：将待纯化液加入MCX固相萃取柱中进行过柱，优选地，控制待纯化液的过柱流速为1滴/3～4s；依次采用甲酸水溶液和甲醇溶液对MCX固相萃取柱中的待纯化液进行淋洗，得到淋洗柱；采用氨水甲醇溶液对淋洗柱进行洗脱，所得洗脱液即为纯化液。

进一步地，甲酸水溶液中甲酸的质量浓度为1.5～3％，优选地，甲酸水溶液和甲醇溶液的体积各自独立地为3～10mL；优选地，氨水甲醇溶液中氨水的质量浓度为4.5～6％，体积为8～15mL。

进一步地，对纯化液进行定容，得到调味品的待测样品的步骤包括：对纯化液进行干燥，得到纯化物；采用乙腈-0.1％甲酸溶液对纯化物进行溶解后过滤，所得上清液即为调味品的待测样品。

进一步地，采用滤膜对纯化物进行溶解后过滤，优选滤膜的孔径为0.22～0.4μm。