[发明专利]一种基于菌丝球结构调控的纳他霉素合成工艺

权利要求书

1.一种基于菌丝球结构调控的纳他霉素合成工艺，其特征在于：

在纳他霉素发酵种子预培养阶段中，利用惰性微粒与产生菌菌丝球之间的碰撞作用，以缩小菌丝球的直径，降低菌丝球的致密程度，并将以上菌丝球结构受到改造的发酵种子用于纳他霉素发酵，从而提高纳他霉素的生物合成水平。

2.根据权利要求1所述的合成工艺，采用分批发酵的方式，其特征在于包括如下步骤：

步骤1：斜面孢子的培养

将褐黄孢链霉菌接种于固体贝塔纳培养基斜面上，于29℃恒温培养箱中培养直至产生褐黄色孢子；用接种环挑取3环孢子置于装有60mL液体种子培养基的500mL三角瓶中，液体种子培养基中预添加一定量的惰性微粒，于29℃、220rpm条件下恒温振荡培养2天；

步骤2：分批发酵

在5L发酵罐中加入3L纳他霉素发酵培养基，于高温灭菌锅中115-121℃灭菌20-30min，其中葡萄糖单独灭菌；随后，以8％的接种量接种步骤1获得的发酵种子，于初始pH值7.2、温度29℃、溶氧保持在30％以上的培养条件下发酵，直至葡萄糖消耗殆尽；发酵pH值采用自动流加NaOH溶液的方式控制pH值为7.0直至分批发酵结束。

3.根据权利要求2所述的合成工艺，其特征在于：

步骤1中，所述褐黄孢链霉菌为褐黄孢链霉菌Z8。

4.根据权利要求2所述的合成工艺，其特征在于：

步骤1中，所述固体贝塔纳培养基的配方以1L计，包括如下：葡萄糖10g，酵母粉1g，蛋白胨2g，琼脂20g，pH7.5；所述液体种子培养基的配方以1L计，包括如下：葡萄糖20g，酵母粉6g，大豆蛋白胨6g，NaCl 5g，pH 7.5。

5.根据权利要求2所述的合成工艺，其特征在于：

步骤1中，所述惰性微粒为玻璃珠、石英砂或滑石粉。

6.根据权利要求5所述的合成工艺，其特征在于：

所述玻璃珠的直径为2mm，所述石英砂的尺寸为40-70目，所述滑石粉的尺寸为6μm。

7.根据权利要求6所述的合成工艺，其特征在于：

所述玻璃珠的添加比例为5-35个/30mL，所述石英砂的添加比例为1-7g/L，所述滑石粉的添加比例为1-7g/L。

8.根据权利要求5或6所述的合成工艺，其特征在于：

所述惰性微粒为滑石粉，添加量为3-4g/L。

9.根据权利要求2所述的合成工艺，其特征在于：

步骤2中，所述纳他霉素发酵培养基的配方以1L计，包括如下：葡萄糖80g，酵母粉10g，大豆蛋白胨20g，NaCl 5g，pH 7.5。