[发明专利]一种基因修饰的免疫细胞及其制备方法和应用有效

专利信息
申请号: 201910372692.5 申请日: 2019-05-06
公开(公告)号: CN110055224B 公开(公告)日: 2023-06-30
发明(设计)人: 请求不公布姓名 申请(专利权)人: 深圳市体内生物医药科技有限公司
主分类号: C12N5/10 分类号: C12N5/10;C12N15/867;A61K39/00;A61P35/00;A61P35/02;A61P31/18
代理公司: 北京品源专利代理有限公司 11332 代理人: 巩克栋
地址: 518102 广东省深圳市*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 基因 修饰 免疫 细胞 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种免疫细胞,其特征在于,所述免疫细胞过表达HIL-6或L-GP130;

所述HIL-6的氨基酸序列如SEQ ID NO: 1所示;

所述L-GP130的氨基酸序列如SEQ ID NO: 3所示;

所述免疫细胞为T细胞;

所述免疫细胞修饰有一种或者两种以上的CAR分子。

2.根据权利要求1所述的免疫细胞,其特征在于,所述HIL-6的核酸序列如SEQ ID NO:2所示;

所述L-GP130的核酸序列如SEQ ID NO: 4所示。

3.根据权利要求1所述的免疫细胞,其特征在于,所述T细胞包括CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD8+T细胞、NKT细胞或γδT细胞中的任意一种或至少两种的组合。

4.根据权利要求3所述的免疫细胞,其特征在于,所述T细胞为CD4+T细胞、CD8+T细胞或CD4+CD8+T细胞。

5.根据权利要求4所述的免疫细胞,其特征在于,所述CAR分子的胞外scFv序列识别抗原为CD19、MUC1或GPC3中的任意一种;

其中抗CD19 CAR的scFv1的氨基酸序列如SEQ ID NO: 5所示,核酸序列如SEQ ID NO:6所示;

其中抗CD19 CAR的scFv2-7的氨基酸序列如SEQ ID NO: 7-12所示;

其中抗GPC3 CAR的scFv的氨基酸序列如SEQ ID NO: 13所示,核酸序列如SEQ ID NO:14所示。

6.根据权利要求4所述的免疫细胞,其特征在于,所述CAR分子的胞内共刺激信号传导结构域包括CD28、4-1BB、TLR2或DAP10中的任意一种或至少两种分子的胞内结构域组合;

所述TLR2的氨基酸序列如SEQ ID NO: 23所示,核酸序列如SEQ ID NO: 24所示;

所述4-1BB的氨基酸序列如SEQ ID NO: 25所示,核酸序列如SEQ ID NO: 26所示;

所述CD28的氨基酸序列如SEQ ID NO: 27所示,核酸序列如SEQ ID NO: 28所示;

所述DAP10的氨基酸序列如SEQ ID NO: 31所示,核酸序列如SEQ ID NO: 32所示;

所述CAR分子的信号肽的核酸序列如SEQ ID NO: 33所示;

所述CAR分子的跨膜区的核酸序列如SEQ ID NO: 34所示;

所述CAR分子的CD3ζ的核酸序列如SEQ ID NO: 35所示。

7.一种如权利要求1-6任一项所述的免疫细胞的制备方法,其特征在于,所述方法包括将HIL-6或L-GP130过表达于免疫细胞中。

8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述过表达包括持续性过表达和/或条件性诱导过表达。

9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述过表达为条件性诱导过表达;

所述条件性诱导过表达包括CAR识别激活诱导过表达和/或外源化合物诱导过表达。

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