[发明专利]一种缩宫素[-NH2]杂质的精制方法

权利要求书

1.一种缩宫素[-NH₂]杂质的精制方法，其特征在于，其包括如下步骤：采用高效液相反相色谱法将缩宫素[-NH₂]杂质粗品溶液依次进行反相富集、反相转盐、反相纯化，即可；

所述的高效液相反相色谱法的填料为超耐水填料；所述超耐水填料为UniSil ODS-AQ超耐水填料；

所述的反相富集、反相转盐、反相纯化均是在一步反相洗脱过程中完成，所述的反相富集、反相转盐、反相纯化的条件如下：

其中，流动相A为体积百分比为0.005~0.1%的乙酸/水溶液，流动相B为体积百分比为0.005~0.1%的乙酸/乙腈溶液，样品C1为所述的缩宫素[-NH₂]杂质粗品溶液，流动相C2为5~50mM NH₄Ac-NH₄OH水溶液，所述的流动相C2的pH为7.0~9.0，流速为80~100ml/min；

收集保留时间为80~89min的洗脱液即得缩宫素[-NH₂]杂质溶液；

所述的缩宫素[-NH₂]杂质粗品溶液中缩宫素[-NH₂]杂质的结构式为。

2.如权利要求1所述的缩宫素[-NH₂]杂质的精制方法，其特征在于：所述的缩宫素[-NH₂]杂质粗品溶液为固相合成的还原型缩宫素[-NH₂]杂质粗品经溶解、稀释、氧化而得。

3.如权利要求2所述的缩宫素[-NH₂]杂质的精制方法，其特征在于：所述的还原型缩宫素[-NH₂]杂质粗品经溶解、稀释得还原型缩宫素[-NH₂]杂质粗品溶液，所述的还原型缩宫素[-NH₂]杂质粗品溶液中还原型缩宫素[-NH₂]杂质粗品的浓度为0.1~4mg/ml；溶解所述还原型缩宫素[-NH₂]杂质粗品的溶剂为体积百分比为50%的乙酸/水溶液。

4.如权利要求3所述的缩宫素[-NH₂]杂质的精制方法，其特征在于：所述的还原型缩宫素[-NH₂]杂质粗品溶液中还原型缩宫素[-NH₂]杂质粗品的浓度为0.5~2mg/ml。

5.如权利要求1所述的缩宫素[-NH₂]杂质的精制方法，其特征在于：所述缩宫素[-NH₂]杂质粗品溶液中的溶剂为含三氟乙酸和乙酸的水溶液。

6.如权利要求1所述的缩宫素[-NH₂]杂质的精制方法，其特征在于：所述超耐水填料的孔径为7~10nm，粒径为10μm。

7.如权利要求1所述的缩宫素[-NH₂]杂质的精制方法，其特征在于：所述的高效液相反相色谱法的检测波长为220nm。

8.如权利要求1所述的缩宫素[-NH₂]杂质的精制方法，其特征在于：所述的流动相A为体积百分比为0.02~0.05%的乙酸/水溶液；

和/或，所述的流动相B为体积百分比为0.02~0.05%的乙酸/乙腈溶液；

和/或，所述的流动相C2为10~20 mM NH₄Ac-NH₄OH水溶液；

和/或，所述的流动相C2的pH为7.5~8.5；

和/或，所述的缩宫素[-NH₂]杂质粗品溶液的HPLC纯度为60~85%；

和/或，所述的收集保留时间为83~86min的洗脱液即为缩宫素[-NH₂]杂质溶液。