[发明专利]一种工业化提取淀粉酶抑制剂的方法在审
申请号: | 201910379328.1 | 申请日: | 2019-05-08 |
公开(公告)号: | CN111909248A | 公开(公告)日: | 2020-11-10 |
发明(设计)人: | 于淼 | 申请(专利权)人: | 无锡华康生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K14/415 | 分类号: | C07K14/415;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/34 |
代理公司: | 无锡市朗高知识产权代理有限公司 32262 | 代理人: | 赵华 |
地址: | 214000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 工业化 提取 淀粉酶 抑制剂 方法 | ||
1.一种工业化提取淀粉酶抑制剂的方法,其特征在于:S1、选取材料,进行低温粉碎,并加水调节PH值;S2、将S1得到的混合物在室温下放置,并加入丙酮粉,离心处理,保留上清液;S3、将上清液灭除内源性α-淀粉酶活性,然后离心取上清液;S4、将S3得到的上清液中加入硫酸铵,收集沉淀;S5、沉淀物透析除盐得到蛋白溶液;S6、加入碱性蛋白酶酶解杂蛋白;S7、进行NaCl浓度梯度洗脱、收集活性洗脱峰,脱盐,冷冻干燥,获得冻干粉。
2.根据权利要求1所述的一种工业化提取淀粉酶抑制剂的方法,其特征在于:S1中,将材料粉碎至100目一下。
3.根据权利要求1所述的一种工业化提取淀粉酶抑制剂的方法,其特征在于:S2中,100g材料加入300-600mL丙酮粉的量。
4.根据权利要求1所述的一种工业化提取淀粉酶抑制剂的方法,其特征在于:S3中,4℃下搅拌2h,然后高速离心机上离心30min以上。
5.根据权利要求1所述的一种工业化提取淀粉酶抑制剂的方法,其特征在于:S4中,收集30%-80%硫酸铵沉淀。
6.根据权利要求1所述的一种工业化提取淀粉酶抑制剂的方法,其特征在于:S5中,用磷酸盐缓冲液溶解蛋白质,得到蛋白液。
7.根据权利要求1所述的一种工业化提取淀粉酶抑制剂的方法,其特征在于:S6中,将蛋白液浓度调整为10-20mg/mL,温度为50-60℃,pH为6.5-7.5,碱性蛋白酶的添加量为2-6U/g蛋白质,酶解时间为2-4h。
8.根据权利要求1所述的一种工业化提取淀粉酶抑制剂的方法,其特征在于:S7中,用20mM Tris-HCl100mM NaCl pH8.0缓冲液洗脱。
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