[发明专利]金纳米粒子负载β-环糊精功能化石墨烯生物传感器的制备及应用

权利要求书

1.一种金纳米粒子负载β-环糊精功能化石墨烯电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，该制备方法具体按以下步骤进行：

1）按体积比1︰1︰1.5︰25，分别取质量分数为1%的氯金酸溶液、质量分数为0.7%的抗坏血酸溶液、摩尔体积浓度为0.2mol/L的碳酸钾溶液和蒸馏水，将氯金酸溶液、碳酸钾溶液和蒸馏水混匀，在搅拌的条件下加入抗坏血酸溶液；加蒸馏水定容，加热至溶液变为透明红色为止，制得粒径为10～15nm的金纳米粒子；

2）按40mL去离子水中加入10mL质量体积浓度为8mg/mL的氧化石墨烯悬浮液和1.5mL环氧氯丙烷的比例，分别取去离子水、氧化石墨烯悬浮液和环氧氯丙烷，氧化石墨烯悬浮液加入去离子水中，超声，得均一氧化石墨烯悬浮液；向该均一氧化石墨烯悬浮液中加入氢氧化钠溶液，待均一氧化石墨烯悬浮液的pH值为9.5～10.0后，逐滴加入环氧氯丙烷，在60～80℃的温度下磁力搅拌3～4h，离心，水洗，得环氧基团功能化氧化石墨烯；

3）按质量比1︰10～15，分别取环氧基团功能化氧化石墨烯和β-环糊精，将环氧基团功能化氧化石墨烯完全溶解于pH值为9.5～10.0的碳酸缓冲溶液中，加入β-环糊精，在60～70℃的温度下磁力搅拌3～4h，离心，水洗，冷冻干燥，得β-环糊精功能化的氧化石墨烯；

4）按质量比1︰6～8︰14～21，分别取粉末状的4-氨基苯硫酚、β-环糊精功能化的氧化石墨烯和金纳米粒子，4-氨基苯硫酚加入无水乙醇中，超声溶解，加入β-环糊精功能化的氧化石墨烯，超声，再加入金纳米粒子，磁力搅拌，离心分离，干燥，得金纳米粒子负载β-环糊精功能化石墨烯复合物；

5）将金纳米粒子负载β-环糊精功能化石墨烯复合物分散在体积分数为75%的乙醇中，得摩尔体积浓度为1mol/L的分散液；

6）用三氧化二铝粉末打磨裸玻碳电极，烘干；在打磨干净的裸玻碳电极表面滴涂1～2滴步骤5）制得的分散液，自然晾干，作为工作电极，铂电极为对电极，饱和甘汞电极为参比电极，构成金纳米粒子负载β-环糊精功能化石墨烯电化学生物传感器。

2.一种权利要求1所述制备方法制得的金纳米粒子负载β-环糊精功能化石墨烯电化学生物传感器在快速检测杏仁露氰化物中的应用。

3.如权利要求2所述的金纳米粒子负载β-环糊精功能化石墨烯电化学生物传感器在快速检测杏仁露氰化物中的应用，其特征在于，具体应用方法为：将硫酸铵溶液作为蛋白沉淀剂，加入杏仁露中，通过盐析法沉淀杏仁露中的蛋白质，再通过离心分离，取上清液定容，在定容后的上清液中加入氯胺T和磷酸，涡旋衍生，得杏仁露中氰化物提取液，将构成的三电极电化学生物传感器放入该杏仁露中氰化物提取液中，在电压-0.1～1.0V、电流0～-10μA的条件下，通过电化学工作站CHI600E对氰化物进行定量和定性快速检测。

4.根据权利要求3所述的金纳米粒子负载β-环糊精功能化石墨烯电化学生物传感器在快速检测杏仁露氰化物中的应用，其特征在于，该电化学生物传感器对氰化物具有良好的线性关系，最低检测限为0.05μg/mL。