[发明专利]一种转基因抗除草剂玉米事件的创制方法在审
申请号: | 201910382625.1 | 申请日: | 2019-04-26 |
公开(公告)号: | CN110184276A | 公开(公告)日: | 2019-08-30 |
发明(设计)人: | 余桂容;杜文平;宋军;徐利远;陈谦;邓自圆;张敏;林杨 | 申请(专利权)人: | 四川省农业科学院生物技术核技术研究所 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46 |
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地址: | 610061*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 互补序列 抗除草剂 转基因 玉米 耐受性 草甘膦除草剂 转基因玉米 核酸序列 | ||
1.一种核酸序列,其特征在于,包括SEQ ID NO:1或其互补序列、和/或SEQ ID NO:2或其互补序列,所述核酸序列源自转基因玉米事件T抗-4。
2.根据权利要求1所述的核酸序列,其特征在于,所述核酸序列包括SEQ ID NO:3或其互补序列、和/或SEQ ID NO:4或其互补序列。
3.根据权利要求2所述的核酸序列,其特征在于,所述核酸序列包括SEQ ID NO:5或其互补序列。
4.一种转基因玉米抗除草剂玉米事件的制备方法,其步骤如下:
a)构建含有SEQ ID NO:5第399-4244位核苷酸所示序列的转化载体;
b)利用农杆菌介导的遗传转化方法将载体转化入玉米幼胚中,经恢复培养后选择愈伤长成新的转基因玉米植株;
c)目的基因分子检测。根据基因序列设计PCR引物对,引物序列分别为SEQ ID NO:12和SEQ ID NO:13,选取转基因玉米叶片进行目的基因扩增,并保留检测结果阳性的植株;
d)转基因玉米植株对除草剂耐受性筛选;
e)转化体目的基因拷贝数检测,保留单拷贝植株;
f)转化体侧翼分离及验证。
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