[发明专利]一种用于预测早发型子痫前期发病的检测试剂盒在审
申请号: | 201910383201.7 | 申请日: | 2019-05-09 |
公开(公告)号: | CN110004223A | 公开(公告)日: | 2019-07-12 |
发明(设计)人: | 张鹏杰;孙淼;徐智策;陈雄辉;张跃明;李凌君;周秀文 | 申请(专利权)人: | 苏州大学附属第一医院 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12N15/113 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 楼高潮 |
地址: | 215000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测试剂 发型 子痫 预测 核苷酸序列 灵敏度 反向引物序列 正向引物序列 实验操作 试剂盒 检测 应用 | ||
本发明提供了一种用于预测早发型子痫前期发病的检测试剂盒,并公开了用于预测早发型子痫前期发病的核苷酸序列SEQ ID NO.1,以及针对该核苷酸序列的正向引物序列SEQ ID NO.2和反向引物序列SEQ ID NO.3。本发明所述的检测试剂盒能够应用于临床实验操作,该试剂盒提供的检测方法简单,指标单一,预测的特异性达到100%,灵敏度达到88.9%,相对于已有检测方法,特异性和灵敏度极大提高。因此,本发明所公开的检测试剂盒在早发型子痫前期发病预测方面具有广泛的应用前景。
技术领域
本发明涉及基因检测技术领域,具体涉及一种用于预测早发型子痫前期发病的检测试剂盒。
背景技术
早发型子痫前期是妊娠期严重疾病,一般在妊娠20周以后发病,发病特征为血压持续升高(≥160/110 mmHg)。可导致孕妇产后出血、胎盘早剥、早产、死胎等并发症,常造成严重的母婴发病率及死亡率。早发型子痫前期在我国的发病率约为3%以内,子痫前期在我国的发病率约为2-8%。因此,如能及早预测,并进行适时干预,将极大的减少母婴发病率及死亡率。
目前临床上对早发型子痫前期的预测还依赖于医师对血压、蛋白尿及靶器官损害的筛查,尚未有环状RNA (circRNA) 检测水平的预测方法。
已有研究报道的一些预测方法,如血浆生物标志物和易感基因,由于其特异性差,灵敏性低,或需要多分子联合诊断预测,无法真正应用于临床。
CircRNA存在于人的血液和尿液当中,为环状RNA,在体内能稳定表达,不易降解。利用目前最为成熟的分子型诊断技术即实时聚合酶链反应(Quantitative Real-timePolymerase Chain Reaction ),设计特异性引物,即可实施检测。
因此,为提高对早发型子痫前期发病预测的特异性和灵敏度,本领域的技术人员致力于寻找血液预测的诊断标志物(circRNA),开发出用于预测早发型子痫前期发病的检测试剂盒。
发明内容
鉴于上述现有技术的缺陷,本发明所要解决的技术问题是找到能准确预测早发型子痫前期发病的circRNA,开发出能用于预测早发型子痫前期发病的检测试剂盒,提高早发型子痫前期发病预测的特异性和灵敏度。
为了实现上述目的,本发明提供以下技术方案:
一种用于预测早发型子痫前期发病的核苷酸序列,所述的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
一种用于预测早发型子痫前期发病的检测试剂盒,包括针对权利要求1所述核苷酸序列的正向引物序列SEQ ID NO.2和反向引物序列SEQ ID NO.3。
进一步的,以上所述的用于预测早发型子痫前期发病的检测试剂盒还包括管家基因β-actin以及管家基因的引物。
进一步的,以上所述的用于预测早发型子痫前期发病的检测试剂盒还包括总RNA抽提试剂、和/或cDNA反转录试剂、和/或PCR定量试剂。
进一步的,所述总RNA 抽提试剂为RNAiso plus试剂。
进一步的,所述cDNA反转录试剂为cDNA first strand synthesis 试剂。
进一步的,所述PCR定量试剂为SYBR Green I。
进一步的,所述检测试剂盒的反应条件为:95℃ 3min,95℃ 10s,60℃ 30s,40个循环。
进一步的,待测样本与阴性样本的ΔCt值>3.2,即可初步判断为早发型子痫前期。
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