[发明专利]一种用于甘蔗花粉活性测定时花粉采集的方法

说明书

本发明提出一种用于甘蔗花粉活性测定时花粉采集的方法，其包括甘蔗开花花穗发育阶段选定、花穗采集方法、花药采集方法、花粉活性测定及活性统计方法等。本发明通过对甘蔗花粉活性测定时花粉采集方法进行创新，具有精准、快速、易操作、灵活和科学可靠的特点，当天可直接对杂交亲本父母性进行界定，并用于指导甘蔗杂交组合选配，可显著提高甘蔗杂交组合的成功率和杂交种子结实率。

技术领域

本发明涉及一种用于甘蔗花粉活性测定时花粉采集的方法。

背景技术

甘蔗品种改良主要依靠有性杂交选育。甘蔗花粉活性测定中花粉的采集是甘蔗有性杂交的关键技术环节，是否有花粉、花粉活力情况决定甘蔗杂交父本与母本的界定和杂交组合的选配。甘蔗花粉属于典型三核型花粉，外壁薄，受外界环境影响较大，其活性离开花药后很快就失去活力。可见，甘蔗花粉的采集对甘蔗花粉活性测定至关重要，关系到花粉活性测定的精确度和准确度。

因此，为了能够精准测定甘蔗花粉的活性和花粉量，提高甘蔗杂交组合选配的成功率和杂交结实率，很有必要对甘蔗花粉采集方式进行研究。长期以来甘蔗花粉活性测定中花粉采集方式，一直采用将要开花的甘蔗亲本砍回，并于翌日早晨7:00-10:00点开始散粉时收集花粉的方式进行，该方式采集的花粉是花药开裂并离开花药进行采集，增加花粉暴露在外界条件下活性测定的不确定性，影响花粉活性测定的精准度。此外，该花粉采集方式工作量较大、时间较长、浪费亲本材料资源，不利于甘蔗杂交花穗生产效率的提高。

发明内容

本方法是用于甘蔗花粉活性测定时花粉采集的有效手段，通过花粉采集手段的创新，达到精准、快速、易操作、灵活和科学可靠的花粉活性测定目的。

为了实现上述目的，本发明采用的以下技术方案：

一种用于甘蔗花粉活性测定时花粉采集方法，所述方法包括以下步骤：

S1选取需要花粉活性测定的甘蔗亲本进行开花花穗发育阶段观察，并选定整个植株第一个花药开裂的花穗；

S2取已选定的花穗的枝梗，并做好标记；

S3将标记好的花穗枝梗用尖头镊子取出花穗中的花药，并将花药中的花粉挤出并放在载玻片上；

S4取溶度为5％的KI溶液1-2ml滴在载玻片上，并进行充分染色；

S5染色结束后放置在显微镜下观察花粉染色情况，花粉粒黑色且为饱满的视为发育良好；

S6于步骤5中取3个视野计算发育。

需要说明的是，所述步骤1中的采集时间为采集当日上午7:00至11：00期间。

需要说明的是，所述步骤2中同一个甘蔗亲本须取三个重复样本，并对各样本进行标记。

需要说明的是，所述步骤3中的所述从花穗中取出的花药须是还未开裂，但相邻的花药已开裂。

需要说明的是，每条枝梗取两个花药，并将每个亲本的花药混匀再做花粉活性测定。

需要说明的是，染色时间为60秒。

本发明相比现有技术的优点在于：

一是，精准。传统的花粉采集是采用花药开裂并离开花药时进行，增加花粉暴露在外界条件下活性测定的不确定性。本方法则采用花粉不离开花药进行，达到精细准确测定花粉活性。

二是，快速、易操作且灵活，提高效率。传统的花粉采集方式，需要将要开花的甘蔗亲本砍回，并于翌日早晨7:00-10:00点开始散粉时收集花粉才能测定。本方法采用现场取带回实验室可快速测定，易操作每天可同时测定100份亲本以上，大大提高了效率，及时为甘蔗杂交组合选配提供父母性依据。

具体实施方式