[发明专利]Act A在制备治疗发育期脑白质损伤疾病的药物中的应用

说明书

本发明公开了Act A在制备治疗发育期脑白质损伤疾病的药物中的应用。实验表明，在新生5日龄SD大鼠构建的WMI模型建立后24h，对患WMI的SD大鼠分别经侧脑室注入人源重组蛋白Act A三种剂量：低剂量12.5mg/kg、中剂量24.5mg/kg、高剂量49mg/kg，经苏木素‑伊红(hematoxylin and eosin，HE)染色显示表明，均可明显改善脑室周围白质坏死、液化。中剂量Act A能够增加少突胶质细胞前体细胞(简称OPC)和少突胶质细胞(Oligodendrocyte)的形成，能够促进髓鞘形成，改善学习与记忆能力。

技术领域

本发明涉及Activin A(激活素A，简称Act A)的用途，尤其是在制药中的用途。

背景技术

脑白质损伤(White Matter Injury，简称WMI)是早产儿常见的神经系统疾病，其主要发病机理为少突胶质细胞前体细胞(Oligodendrocyte precursor cell，简称OPC)受损，可造成运动、认知、行为等多种神经功能缺陷，给社会和家庭带来沉重负担。临床上现有的治疗手段非常有限，主要通过OPC移植，亚低温以及保护内源性少突胶质细胞治疗。因此开发出干预和治疗WMI的药物是社会的需要，具有重要意义。

Activin A(激活素A，简称Act A，在该说明书的后续内容中，以“Act A”代表“Activin A”)属于转化生长因子(Transforming Growth Factor-β，简称TGF-β)超家族成员，是一个广泛表达的由两个βA链构成的同质二聚体(氨基酸序列：Gly311-Ser426；Accession#P08476)，在神经系统中，神经元和胶质细胞均能够分泌Act A，其13kDa成熟的人类βA链与牛、猫、老鼠、猪、等有100％一致的氨基酸序列特征。

目前，Act A主要用于缺氧缺血性脑病、细菌性脑膜炎、高胆红素血症等足月儿脑病治疗的研究。WMI不同于上述疾病，WMI主要发生于早产儿群体，其主要受累细胞是OPC，而缺氧缺血性脑病发生的主要群体是足月儿，其受损细胞是大脑皮层神经元，细菌性脑膜炎、高胆红素血症与WMI具有截然不同的致病机理和临床病理特征。

发明内容

本发明的目的在于证明Act A的新用途，即在制药中的新用途，为治疗发育期脑白质损伤疾病开发新的药品。

本发明通过实验证明：在新生5日龄(即出生第5天)SD大鼠构建的WMI模型建立后24h，对患WMI的SD大鼠分别经侧脑室注入人源重组蛋白Act A三种剂量：低剂量12.5mg/kg、中剂量24.5mg/kg、高剂量49mg/kg，经苏木素-伊红(hematoxylin and eosin，HE)染色显示表明，均可明显改善脑室周围白质坏死、液化。其中，中剂量Act A和高剂量Act A的处理效果较低剂量Act A的处理效果好，中剂量Act A、高剂量Act A之间的处理效果差异不明显，但高剂量Act A的大鼠在后期表现出状态不佳的现象。

注射中剂量(24.5mg/kg)Act A的患WMI的SD大鼠的后续实验结果：经2，3，5-氯化三苯基四氮唑(2，3，5triphenyltetrazoulium tydrochloride，TUNEL)染色显示，SD大鼠的阳性细胞明显减少，说明Act A可减轻细胞凋亡。免疫荧光检测胼胝体区OPC标志物NG2，少突胶质细胞(Oligodendrocyte，简称OL)标志物CC1以及髓鞘标志物MBP的表达，结果显示，Act A处理组的NG2，CC1和MBP的表达量明显增加，说明Act A可促进髓鞘形成。透射电镜观察胼胝体区髓鞘化，结果显示，与PBS溶剂处理组相比，Act A处理后胼胝体区髓鞘纤维排列紧密，髓鞘厚度和数量明显增加。Morris水迷宫实验显示，在第1-4天时，Act A处理组游泳的平均时间与PBS溶剂对照组比较，无明显差异；在第5-6天时，Act A处理组的大鼠游泳过程中的平均潜伏期明显缩短；在第7天的测试期，Act A处理组的大鼠游泳过程中穿越虚拟平台的次数增加，差异均具有统计学意义。