[发明专利]一种用于检测和调控肿瘤mRNA的核酸器件及其构建方法有效
| 申请号： | 201910386615.5 | 申请日： | 2019-05-10 |
| 公开（公告）号： | CN110161244B | 公开（公告）日： | 2022-02-18 |
| 发明（设计）人： | 李海刚;王胜峰;周文虎 | 申请（专利权）人： | 长沙医学院 |
| 主分类号： | G01N33/574 | 分类号： | G01N33/574;C12N15/113 |
| 代理公司： | 长沙市标致专利代理事务所(普通合伙) 43218 | 代理人： | 徐邵华 |
| 地址： | 410219 湖南省长沙市望*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 调控 肿瘤 mrna 核酸 器件 及其 构建 方法 | ||
1.一种用于检测和调控肿瘤mRNA的核酸器件，其特征在于：所述核酸器件包括核酸适配体分子信标探针和通过DNA固相合成技术嵌入至所述核酸适配体分子信标探针环状区域的8-17型DNA酶的活性中心序列，所述核酸器件的序列为：
5'-TTGGTGGTGGTGGTTGTGGTGGTGGTGGTTTT(Int6-FAM)
CTGGCTCCCAGCTCCGAGCCGGTCGAATCCAGCTCCTTGGCCAGA-BHQ-1-3'。
2.如权利要求1所述一种用于检测和调控肿瘤mRNA的核酸器件，其特征在于：所述核酸适配体分子信标探针包括核酸适配体和通过TTT序列与所述核酸适配体串联的分子信标，在所述分子信标的5'和3'端分别连接荧光基团和淬灭基团。
3.如权利要求2所述一种用于检测和调控肿瘤mRNA的核酸器件，其特征在于：所述荧光基团为6-FAM，所述淬灭基团为BHQ-1。
4.如权利要求2所述一种用于检测和调控肿瘤mRNA的核酸器件，其特征在于：所述核酸适配体分子信标探针的序列为：
5'-TTGGTGGTGGTGGTTGTGGTGGTGGTGGTTTT(Int6-FAM)CTGGCTCCCAGCTCCAGCTCCTTGGCCAGA-BHQ-1-3'。
5.如权利要求2所述一种用于检测和调控肿瘤mRNA的核酸器件，其特征在于：所述核酸适配体的序列如SEQ ID NO.1所示。
6.如权利要求2所述一种用于检测和调控肿瘤mRNA的核酸器件，其特征在于：所述分子信标的序列如SEQ ID NO.2所示。
7.如权利要求2所述一种用于检测和调控肿瘤mRNA的核酸器件，其特征在于： 所述8-17型DNA酶的活性中心序列如SEQ ID NO.3所示。
8.一种如权利要求1-7任一项所述用于检测和调控肿瘤mRNA的核酸器件的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：
1）制备核酸适配体分子信标探针：先将SEQ ID NO.2所示的分子信标序列的5'端修饰荧光基团6-FAM，在其3'端修饰淬灭基团BHQ-1，再将SEQ ID NO.1所示的核酸适配体序列通过DNA固相合成技术串联至修饰有荧光基团和淬灭基团的分子信标上，并在核酸适配体的3'端和分子信标上的荧光基团之间嵌入TTT序列，得到核酸适配体分子信标探针；
2）制备核酸器件：将8-17型DNA酶的活性中心序列通过DNA固相合成技术嵌入至步骤1）制备的核酸适配体分子信标探针的环状区域中，所述环状区域的序列为：TCCCAGCTCCAGCTCCTTG，所述活性中心序列嵌入至环状区域序列中第7个碱基C和第8个碱基T之间，得到核酸器件。
9.如权利要求1-8任一项所述用于检测和调控肿瘤mRNA的核酸器件在制备肿瘤诊疗的试剂盒中的应用。
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