[发明专利]一种可再生啶虫脒电化学传感器及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种基于“T”型DNA链可再生的电化学传感器用于啶虫脒检测的方法，其特征在于，所述“T”型DNA链，是具有识别和信号双重功能的不对称发夹结构，啶虫脒适配体作为识别链，与适配体部分互补的DNA作为信号链；所述信号链5’端以亚甲基蓝MB标记；所述识别链5’端和所述信号链3’端通过胸腺嘧啶T连接，胸腺嘧啶T接枝巯基；所述啶虫脒检测方法的具体步骤为：

(1)金修饰玻碳电极Au/GCE：将处理好的玻碳电极作为工作电极，置于含有2.5mMHAuCl₄、0.5M H₂SO₄、150mM乙二胺的电解液中，以Ag/AgCl电极为参比电极，铂电极为辅助电极，在0.0V下进行恒电位沉积600s；

(2)在金修饰玻碳电极Au/GCE上，滴加5μL 0.01μM的“T”型DNA链，置于40℃的真空干燥箱中孵化1h；以5μL、10μM的6-巯基己醇封闭非特异性结合位点，用0.1M、pH 7.4的PBS溶液冲洗三次，制得DNA/Au/GCE电极，在冰箱4℃下保存，备用；

(3)在DNA/Au/GCE电极表面滴涂5μL啶虫脒溶液，置于60℃的真空干燥箱中孵化1h，拿出冷却后，用0.1M pH 7.4的PBS溶液反复冲洗，备用；

(4)以孵化了啶虫脒的DNA/Au/GCE为工作电极，以Ag/AgCl电极为参比电极，铂电极为辅助电极，在-0.6～0.2V电位区间，进行DPV扫描，记录峰电流；

(5)将每次完成检测后的电极，浸入0.01mol/L的HCl溶液中，5min后取出，以0.1M pH7.4的PBS溶液反复冲洗，备用。