[发明专利]一种凤梨花组织培养方法

权利要求书

1.一种凤梨花组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、取样：切取凤梨冠芽带回实验室，将凤梨冠芽外层叶片剥去，待凤梨冠芽露出最内层的茎顶部位即可；

S2、杂菌去除：将S1中剥去外层叶片的凤梨冠芽放入稀释5倍的市售漂白水内消毒20分钟，待其消毒完毕后使用无菌水漂洗3次，每次10分钟，即可除去芽体表面上附着的大部份杂菌；

S3、组织培养：切取S2中凤梨冠芽茎顶部位组织，横切成片状，放在培养基上培养，培养基基本成份为植物生长调节剂，再向培养基内加入微量细胞分裂素BA，3个月之后，含有茎顶的培植体，向上延伸长大变成冠芽状，未含茎顶的培植体，则在侧面长出若干芽体；

S4、丛生芽体产生：将S3中的无菌芽体切下来，转移到另一种培养基上培养，培养基仍然采用植物生长调节剂MS配方，再添加诱导发芽BA及广谱型植物生长调节剂NAA，培养一个月之后，在培植体基部开始产生小芽体，2个月后变成丛生状芽体，每一个培植体可产生20-30个丛生芽；

S5、枝条增殖:切取S4中产生的丛生芽，将一部分丛生芽移到同样含有细胞分裂素BA、广谱型植物生长调节剂NAA的培养基上培养，则会持续产生丛生芽体，将另一部分丛生芽切成数块，使每一块带有数个芽体，放到含低浓度细胞分裂素BA的培养基上培养，6周之后，丛生芽体分别长大，其叶片和茎部抽长变成枝条，枝条生长状况均一；

S6、发根：将S5中的枝条切下，直接放在培养基上，经一个月后，植株基部长出不定根，成为完整植株，无菌培养阶段至此完成；

S7、出瓶驯化：将S6中培养的植株夹出瓶后先以清水洗去根部附着的洋菜，再以杀菌剂浸渍30分钟，再种植于清洁无病菌的栽培介质中，然后放置在驯化室中30天，即可完成驯化作业；

S8、种植植株：驯化完成之后，选取适宜的田间进行种植。

2.根据权利要求1所述的一种凤梨花组织培养方法，其特征在于：所述步骤S3中在组织培养的前6周期间必须淘汰掉被杂菌污染的培植体，留下完全无菌培植体。

3.根据权利要求1所述的一种凤梨花组织培养方法，其特征在于：所述步骤S6中发根用培养基仍是采用植物生长调节剂MS，再添加广谱型植物生长调节剂NAA即可。

4.根据权利要求1所述的一种凤梨花组织培养方法，其特征在于：所述步骤S7中驯化室可采用塑料布覆盖的隧道棚，刚开始时全部密闭，且保持内部环境高湿，第三周以后塑料布掀开一部份，使湿度稍微降低，第四周后全部塑料布撤除，植株即可适应外在环境，所述杀菌剂为免赖得2000倍溶液。

5.根据权利要求1所述的一种凤梨花组织培养方法，其特征在于：所述步骤S8中田间需要满足的条件为温度应在平均气温20℃以上多湿条件下，日平均气温20℃-30℃最适宜，同时雨量分布均匀，并且光照充足，土壤为PH在5-6的酸性土壤。