[发明专利]一种同时定位多个基因的方法

权利要求书

1.一种同时定位多个基因的方法，包括下述步骤：

(1)构建群体：

选取两个具有多种表型差异的纯合自交系亲本P1和P2，以P2为非轮回亲本、P1为轮回亲本进行杂交，获得杂交F1，并继续回交一代得到BC1F1群体，同时F1自交获得F2群体；

(2)利用分子标记辅助基因分型：

选取一整套均匀分布的分子标记，以任意一个BC1F1单株与任意一个F2单株为样本，筛选共显性的多态性标记；种植F2群体，使用筛选出来的共显性多态标记对所有F2单株进行基因型分析；

(3)分组种植并调查性状：

将标记基因型相同的F2单株种植在一起，调查各基因型植株的表型性状，以某一位点纯合显性、其他位点分离的基因型的植株为一组，以对应位点纯合隐性、其他位点分离的基因型的植株为另一组，对各表型性状进行统计分析，确定具有显著差异的性状作为候选的目标性状；

(4)验证：

使特定位点杂合、其他位点纯合的基因型的F2单株自交，获得F3群体，用特定位点的分子标记对F3群体进行基因分型，并按基因型分组种植，调查候选性状在分组之间是否存在显著差异，如果存在显著差异，则可以确定是特定位点的目标性状，从而将目标性状定位在特定的分子标记附近。

2.根据权利要求1所述的同时定位多个基因的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述分子标记为共显性分子标记；优选地，所述分子标记为SSR标记、InDel标记或SNP标记。

3.根据权利要求1所述的同时定位多个基因的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，选取的共显性多态标记位点数为2～5个；可选的，如果结合表型组学手段，则不受共显性多态标记位点数限制。

4.根据权利要求1所述的同时定位多个基因的方法，其特征在于，所述步骤(3)中，分组种植时，每种基因型的F2单株种植3株或3株以上。

5.根据权利要求1所述的同时定位多个基因的方法，其特征在于，所述步骤(3)中，所述统计分析方法包括t检验、方差分析等。

6.根据权利要求1所述的同时定位多个基因的方法，其特征在于，所述步骤(4)还可以用以下方法替代：使特定位点杂合、其他位点纯合的基因型的F2单株与特定位点隐性纯合、其他位点纯合的F2单株测交，获得F3群体，调查候选性状在F3群体中是否符合1:1的分离比，如果符合，则可以确定是特定位点的目标性状；用特定位点的分子标记对F3群体进行基因分型，获得每个单株的候选性状和标记基因型，并根据重组单株数量估计基因位点与分子标记之间的遗传距离。