[发明专利]基于基因操作策略构建疾病模型的方法和应用

权利要求书

1.基于基因操作策略构建疾病模型的方法，所述模型为动物模型，其特征在于，所述疾病模型为视网膜新生血管疾病模型，通过基因操作技术使Emc3基因在目标动物的血管内皮细胞中不表达；

或者所述疾病模型为小脑共济失调疾病模型，通过基因操作技术使Emc3基因在目标动物的小脑浦肯野细胞中不表达；

通过基因操作技术使Emc3基因在目标动物的血管内皮细胞或小脑浦肯野细胞中不表达是指：通过Cre-loxp基因敲除技术敲除Emc3基因的第二外显子使Emc3基因在目标动物的血管内皮细胞或小脑浦肯野细胞中不表达；

所述目标动物为小鼠。

2.根据权利要求1所述的基于基因操作策略构建疾病模型的方法，其特征在于，所述基因操作技术包括如下步骤：

对Emc3^loxp/loxp-Pdgfb-Cre小鼠腹腔注射他莫昔芬以诱导Emc3基因敲除。

3.根据权利要求2所述的基于基因操作策略构建疾病模型的方法，其特征在于，Emc3^loxp/loxp-Pdgfb-Cre小鼠出生后的第1、2、3、5天进行腹腔注射他莫昔芬。

4.根据权利要求2所述的基于基因操作策略构建疾病模型的方法，其特征在于，每天腹腔注射他莫昔芬一次，他莫昔芬的注射剂量为50μg/只。

5.根据权利要求1-4任一项所述的基于基因操作策略构建疾病模型的方法，其特征在于，所述视网膜新生血管疾病模型表现出如下特征中的至少一种：

(1)表层或深层视网膜血管发育迟缓，血管发育速度下降18％；

(2)血管密度降低，血管密度下降20％；

(3)血管顶端细胞数目减少，血管顶端细胞数目减少43％；

(4)玻璃体血管退化减缓；

(5)视网膜血管内皮细胞增殖减缓，视网膜血管内皮细胞增值速度下降33％；

或者所述小脑共济失调疾病模型表现出如下特征中的至少一种：

(1)步态不稳，提起尾部后肢蜷缩；

(2)小脑进行性萎缩，小脑分子层逐渐变薄，颗粒细胞减少；

(3)小脑中浦肯野细胞逐渐减少。

6.由权利要求1-5任一项所述的基于基因操作策略构建疾病模型的方法所得到的疾病模型在研究视网膜新生血管疾病或小脑共济失调疾病中的应用，其特征在于，所述研究是以非疾病的治疗为目的；所述研究为视网膜新生血管疾病发病机制或机理研究或所述研究为筛选治疗视网膜新生血管疾病的药物研究，或者所述研究为小脑共济失调疾病发病机制或机理研究或所述研究为筛选治疗小脑共济失调疾病的药物研究。