[发明专利]应用骨胶原的稳定同位素对肉羊产地溯源的方法

权利要求书

1.一种应用骨胶原的稳定同位素对肉羊产地溯源的方法，其特征在于，该方法的具体步骤为：

a)将羊骨进行骨胶原提取；

b)对羊骨中提取的骨胶原进行稳定同位素δ13C和δ15N值的测定；

c)应用统计软件对羊骨中骨胶原δ13C和δ15N值进行显著性差异多重比较-Duncan分析；

d)应用统计软件对羊骨中骨胶原δ13C和δ15N值进行PLS-DA偏最小二乘法判别分析；

步骤a)中，所述骨胶原提取的方法为：用去离子水将骨样表面清洗干净；将剔取的羊骨表面打磨，将骨头表面的肉除掉；在60℃的烘箱里对骨样放入培养皿中进行干燥，每隔12h取出一次，称量计算前后一次的差值，差值小于0.05g时，即为干燥完全；截取重300mg-600mg的骨样，并计入下每份样品所取的骨样重量；将骨样置于玻璃烧杯中，加人去离子水，放入超声波清洗仪中清洗两次，每次3min；从清洗液中移除出样品，加入2mol/L的HCl溶液至完全将骨样浸泡，用保鲜膜封闭烧杯口后置于4℃冰箱中冷藏脱钙；每隔一天更换酸液，直至骨样松软、无气泡冒出为止；取出松软漂浮的骨样，加去离子水洗至中性；继而加入0.125mol/L的NaOH溶液浸泡24h以去除腐殖酸；经上述处理后的骨样移入塑料离心管中加入去离子水，5000r/pm离心15min，弃上清液；重复该步骤直至骨样呈中性；加入0.001mol/L的HCl溶液，锡纸封口后放入90℃烘箱中进行明胶化；明胶化后将剩余液体进行过滤，取上清液于新的10ml离心管中，冷冻干燥后制得骨胶原；将制得的骨胶原用研磨机磨粉备用。

2.根据权利要求1所述的应用骨胶原的稳定同位素对肉羊产地溯源的方法，其特征在于：所述统计软件为SPSS统计软件。