[发明专利]用于指导氟伐他汀药物个体化用药相关基因检测的引物探针组合及试剂盒及应用

说明书

本发明公开了一种用于指导氟伐他汀药物个体化用药相关基因SNP的特异性引物探针组合，其特征在于，所述引物探针组合包括针对rs4783961、rs11045819、rs1922242基因SNP的特异性引物探针组合。本发明还提供了包含所述引物组合的试剂盒及其应用。本发明的有益效果在于：提供了一种快捷的用于指导氟伐他汀药物个体化用药相关基因SNP的分型试剂盒及应用，应用本发明获得的检测结果精确可靠，且成本较低，具有较好的实用性。

技术领域

本发明涉及体外诊断技术领域，具体涉及一种用于指导氟伐他汀药物个体化用药相关基因检测的引物探针组合及试剂盒及应用。

背景技术

氟伐他汀(fluvastatin)是一种优良的降血脂药，是第一个全化学合成的降胆固醇药物，为羟甲戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂，可将HMG-CoA转化为3-甲基-3,5-二羟戊酸。若患者大量使用他汀类药物易发生肝损伤、肌肉毒性、肾功能障碍等不良反应，其发生率呈现几何倍数增长。

《药物代谢酶和药物作用靶点基因检测技术指南(试行)》指出：对药物代谢酶和药物靶点基因进行检测，可指导临床针对特定的患者选择合适的药物和给药剂量实现“个体化”用药，从而提高药物治疗的有效性和安全性。建议临床上根据SLCO1B1基因型选择他汀类药物进行治疗。

有研究表明，HDL-C水平的升高和LDL-C水平的降低与CETP的缺乏有关，可能这一多态的TT纯合子造成CETP缺陷，导致不同基因型血浆中的CETP水平不同，使得不同基因型的个体对氟伐他汀的反应不同。

他汀类药物治疗效果存在明显的个体化差异，随之而来的毒副作用也严重危害病患的健康。通过检测氟伐他汀代谢、转运或作用靶点基因，可以及早发现不同个体对氟伐他汀的药物敏感程度，从而实现氟伐他汀的“个体化”用药，增强其用药剂量的依从性，以降低用药剂量不当引起的风险，提高治疗疗效。

目前市场上采用的基因多态性检测技术有PCR-RFLP，其主要原理是通过应用特异性限制性内切酶消化PCR扩增产物，并根据消化位点是否消失来判断其变异存在与否，但该方法操作复杂，样本量多时易造成PCR产物的交叉污染且容易出现酶切不充分或酶切过度而出现假阴性或假阳性结果，可靠性低。多重PCR方法尽管特异性有所提高，但是这种方法的原理仍然是基于普通PCR的原理，引物特异性以及低保真Taq酶等这些因素均可造成对结果的影响。DNA测序法虽然是目前进行基因诊断的金标准，但步骤繁琐，过程复杂，试剂价格昂贵，容易出现样本间的交叉污染而导致测序失败；另外测序仪的装备也超出了一般临床检验实验室的承受范围。高分辨率熔解曲线法是一种快速，简便，经济，实用的分型方法，但基因分型依赖于仪器温度控制的精密性，假阳性高。Taqman探针的方法采用特异性的荧光标记的探针，特异性强，灵敏度高且操作方便，快速。

发明内容

为了解决传统临床经验医疗方式诊断及氟伐他汀药物用药时易出现临床用药不良反应且没有合适的试剂盒产品的技术问题。

本发明是采用Taqman探针与荧光定量PCR技术相结合的检测试剂盒，适用于临床推广和产业化。

本发明的目的之一在于提供一种用于指导氟伐他汀药物个体化用药相关基因SNP的引物探针组合。

本发明的目的之二在于提供包含所述相关基因SNP的引物探针组合的试剂盒

本发明的目的之三在于所述试剂盒的应用。

为实现本发明的目的之一，本发明提供了一种用于指导氟伐他汀药物个体化用药相关基因SNP的特异性引物探针组合，所述引物探针组合包括针对rs4783961、rs11045819、rs1922242基因SNP的特异性引物探针组合，具体如下：

rs4783961引物探针序列为：

rs4783961-F：5'-CGTGCTTCTGGGCAGCTTTG-3'；