[发明专利]一种生物正交靶向的细胞膜仿生纳米颗粒及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种生物正交靶向的细胞膜仿生纳米颗粒，其特征在于，其包括高聚物和活性成分构成的纳米核心，以及包裹在纳米核心外部的细胞膜中；

所述细胞膜中嵌有修饰了生物正交的功能基团的基础代谢物；

所述修饰了生物正交的功能基团的基础代谢物中，生物正交的功能基团为叠氮基、炔基、辛炔基、二苯基环辛炔基、四嗪基、DBCO、DIBO、二氟化环辛炔(DIFO)、BARAC(biarylazacyclooctynone)或BCN((1R,8S,9r)-双环[6.1.0]壬-4-炔基-9-基甲醇)；所述的基础代谢物为氨基酸、蛋白质、糖或脂类；所述生物正交的功能基团以及基础代谢物通过化学键偶联；

优选地，所述细胞膜为正常细胞的细胞膜。

2.根据权利要求1所述的生物正交靶向的细胞膜仿生纳米颗粒，所述糖为单糖或者单糖衍生物；所述的脂类为胆碱或胆碱衍生物；

优选地，所述单糖衍生物包括甘露糖胺盐酸盐、葡萄糖胺盐酸盐或半乳糖胺盐酸盐、四乙酰甘露糖(Ac₄Man)、四乙酰半乳糖(Ac₄Gal)、乙酰唾液酸(Neu5Ac)、四乙酰葡萄糖(Ac₄Glc)；

所述单糖选自甘露糖、葡萄糖、半乳糖、脱氧核糖、果糖、核糖、木糖、阿拉伯糖；

所述胆碱类似物包括二甲基乙醇胺；

所述氨基酸衍生物选自甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、色氨酸、丝氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、苏氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸和组氨酸；

更优选地，所述修饰有生物正交的功能基团的基础代谢物选自Ac₄ManNBCN、Ac₄GalNAz、Ac₄ManNAz、Neu5AcBCN、Ac₄GalNAl、Ac4GalNAz、Ac₄ManNAl、AE-Cho、AP-Cho、AlkyneCholesterol、Az-Phe、AHA、HPG。

3.根据权利要求1或2所述生物正交靶向的细胞膜仿生纳米颗粒，具有生物正交的功能基团的基础代谢物通过在细胞培养时加入修饰有生物正交的功能基团的基础代谢物，并通过代谢作用，而将修饰有生物正交的功能基团的基础代谢物镶嵌于细胞膜中。

4.根据权利要求1-3任一项所述生物正交靶向的细胞膜仿生纳米颗粒，构成纳米核心的高聚物为乙交酯丙交酯共聚物。

5.根据权利要求1-4任一项所述生物正交靶向的细胞膜仿生纳米颗粒，所述的活性成分指具有治疗作用的化合物，具体包括具有化疗活性的药物、增强光敏剂、检测试剂、抗肿瘤药物；优选地，所述增强光敏剂选自ICG或Ce6。

6.根据权利要求1-5任一项所述的生物正交靶向的细胞膜仿生纳米颗粒的制备方法，其包括以下步骤：

1)制备修饰有生物正交的功能基团的基础代谢物；

2)天然活性细胞与修饰有生物正交的功能基团的基础代谢物共孵育，直至获得细胞表面嵌入了具有生物正交的功能基团的修饰活细胞；

3)通过物理方法获得细胞表面嵌入了具有生物正交的功能基团的修饰的细胞膜；并通过物理挤压获得细胞膜囊泡；

4)以高分子聚合物作为载体制备包载活性成分的纳米核心；

5)将步骤3)所的的细胞膜囊泡包裹在步骤4)获得纳米核心表面，得到生物正交靶向的细胞膜仿生纳米颗粒。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其中，步骤3)中获得细胞膜的方法为离心获得细胞沉淀，然后在其中加入含蛋白酶抑制剂的低渗裂解液进行裂解，超声破碎细胞，获得细胞膜。

8.根据权利要求6或7所述的制备方法，其中，步骤3)中获得细胞膜后还包含纯化细胞膜的步骤，所述纯化细胞膜步骤通过差速离心的方法，优选地，先以3200×g离心后取上清；上清液，再以1-20000×g高速离心，取上清液；上清液，最后以50000-200000×g高速离心，取沉淀，即得到纯化的细胞膜。