[发明专利]一种纳豆发酵液中维生素K2提取工艺

说明书

本发明公开了一种纳豆发酵液中维生素K2提取工艺，包括以下步骤：1）以大豆、芸豆、黑豆中的一种为原料，筛选去杂，粉碎成豆粉；2）将豆粉加入自身重量3~5倍的水，煮沸10~50min，冷却至60~70℃；3）向豆液中加入有机酸，调节pH为6.0~6.5，接种枯草芽孢杆菌，向豆液中通入空气，温度55~60℃，搅拌发酵36~48h；4）将发酵液离心分离，取上清液，经液相色谱选择分离得维生素K2。本发明的优点在于：1）通过液态发酵，生产过程全封闭、管道化生产，能实现工业自动化生产，实现增产的同时降低生产成本；2）以大豆、芸豆、黑豆中的一种为原料，发酵产生维生素K2产率高；3）提取的维生素K2纯度高达65~70%；4）将副产物烘干制成纳豆粉，增加了附加值提高了经济效益。

技术领域

本发明属于食品发酵技术领域，具体涉及一种纳豆发酵液中维生素K2提取工艺。

背景技术

纳豆起源与中国秦汉时期，将蒸熟的大豆用稻草包裹起来，并保持在摄氏40度放置一日，稻草上常见的枯草杆菌使大豆发酵而得。纳豆气味较臭，味道微甜，不仅保有大豆的营养价值、富含维生素K2、提高蛋白质的消化吸收率，更重要的是发酵过程产生了多种生理活性物质，具有溶解体内纤维蛋白及其他调节生理机能的保健作用。常吃可以预防便秘、腹泻等肠道疾病，提高骨密度，预防骨质疏松，还可以双向调节血压，溶解陈旧血栓斑块，调节血脂，能消除疲劳，综合提高人体免疫力。

传统的纳豆生产先将大豆在10℃左右低温浸泡24小时，再将大豆蒸熟，接种纳豆菌，静态发酵18-20小时而得。期间通过环境温度控制发酵温度，由于固态发酵的限制，不能采用管道化生产，需要人工辅助，且生产设施占地面积大，而发酵温度控制不易，因此不以实现大规模工业生产。

维生素K2具有预防新生儿出血性疾病，治疗和预防骨质疏松症，可诱导肝细胞癌、卵巢癌等多种实体瘤和血液系统的白血病、骨髓增生异常综合征的细胞凋亡，具有明显的抗肿瘤作用，且与多种抗肿瘤药有协同作用。由于房间过程中细胞代谢的复杂性，导致发酵液中除维生素K2外还含有大量其他物质，提取的维生素K2纯度低于60%，从而制约了发酵发制备维生素K2的发展。

发明内容

为克服上述技术问题，本发明提供了一种纳豆发酵液中维生素K2提取工艺。

为达到上述目的，本发明是通过以下的技术方案来实现的。

一种纳豆发酵液中维生素K2提取工艺，包括以下步骤：

1）以大豆、芸豆、黑豆中的一种为原料，筛选去杂，粉碎成豆粉；

2）将豆粉加入自身重量3~5倍的水，煮沸10~50min，冷却至60~70℃；

3）向豆液加入有机酸，调节pH为6.0~6.5，接种枯草芽孢杆菌，向豆液中通入空气，温度55~60℃，搅拌发酵36~48h；

4）将发酵液离心分离，取上清液，经液相色谱选择分离得维生素K2。

进一步地所述步骤3）中有机酸为柠檬酸、苹果酸、酒石酸中的一种。

进一步地所述步骤3）中枯草芽孢杆菌为保藏号CGMCC：1.1404和保藏号CGMCC：1.1373的混合菌种，分别通过活化扩培分别制成菌种液，总菌落数达10⁸cfu/ml以上，然后将CGMCC：1.1404和CGMCC：1.1373的菌种液按体积比1~6:3~7混合，混合菌种液的用量为豆液体积的3~8%。

进一步地所述步骤3）中向豆液中通入空气，通气量0.5~1.2vvm。

进一步地所述步骤4）中将沉淀物用其重量3~5倍的水洗涤2次，离心分离出洗液与上清液合并。

进一步地所述步骤4）中将沉淀物用其重量3~5倍的水洗涤2次，离心分离出洗液与上清液合并。