[发明专利]重组酶介导等温扩增-侧流层析技术检测橡树疫霉的引物和探针组合及其应用在审
| 申请号： | 201910404137.6 | 申请日： | 2019-05-15 |
| 公开（公告）号： | CN109988823A | 公开（公告）日： | 2019-07-09 |
| 发明（设计）人： | 戴婷婷;焦彬彬;徐月;胡涛;廖婷婷 | 申请（专利权）人： | 南京林业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6844 | 分类号： | C12Q1/6844;C12Q1/6895;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645 |
| 代理公司： | 南京申云知识产权代理事务所(普通合伙) 32274 | 代理人： | 邱兴天 |
| 地址： | 210037 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 疫霉 探针组合 引物 条带 检测 层析技术 等温扩增 检测区 试纸条 重组酶 侧流 介导 样本 应用 扩增产物检测 待测样本 技术平台 特异性强 灵敏度 质控区 扩增 阴性 质控 | ||
1.一种重组酶介导等温扩增-侧流层析技术检测橡树疫霉的引物和探针组合，其特征在于，其正向引物序列如SEQ ID No.1所示，反向引物序列如SEQ ID No.2所示，探针序列如SEQ ID No.3所示。
2.权利要求1所述的引物和探针组合在检测橡树疫霉中的应用。
3.权利要求1所述的引物和探针组合在制备橡树疫霉的检测试剂或试剂盒中的应用。
4.一种重组酶介导等温扩增-侧流层析技术检测橡树疫霉的试剂盒，其特征在于，至少包括1次用量以上的引物和探针组合，所述引物和探针组合，其正向引物序列如SEQ IDNo.1所示，反向引物序列如SEQ ID No.2所示，探针序列如SEQ ID No.3所示。
5.权利要求4所述检测橡树疫霉的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括：装有冻干酶粉的TwistAmp反应单元管、Rehydration Buffer、MgAc、去离子水、HybriDetect assaybuffer、侧流层析试纸条。
6.权利要求4所述检测橡树疫霉的试剂盒在检测橡树疫霉中的应用。
7.一种重组酶介导等温扩增-侧流层析技术检测橡树疫霉的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)提取待测样本DNA；2)以DNA为模板，利用权利要求1所述引物和探针组合或权利要求4所述检测橡树疫霉的试剂盒进行RPA扩增；3)应用侧流层析试纸条进行RPA扩增产物检测；当试纸条出现两条棕色条带，一条位于质控区内，一条位于检测区，则结果为阳性，表明样本中含有橡树疫霉；当试纸条只有质控区出现一条棕色条带，检测区没有条带，则结果是阴性，表明样本中不含有橡树疫霉。
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